Luận Văn Xác định phân tử lượng và các thông số động học của urease từ đậu nành hạt vàng Việt Nam

TÓM TẮT: Trong nghiên cứu trước, chúng tôi đã tìm ra được quy trình tinh sạch hiệu
quả urease từ đậu nành hạt vàng Việt Nam. Bột Urease đậu nành tinh khiết có hoạt lực
8.44UI/mg thu từ quá trình tinh sạch trên được sử dụng để xác định một số đặc tính. Kết quả
điện di trên gel polyacrylamid 7,5%, không có SDS và β-mercaptoethanol, so với dãy protein
chuẩn phân tử lượng 35 000Da – 400 000Da đã chỉ ra urease đậu nành Việt Nam có phân tử
lượng khoảng 440 000Da. Urease được xử lý nhiệt với SDS và β-mercaptoethanol, sau đó được
điện di trên SDS-acrylamide gel 10% so với dãy protein chuẩn phân tử lượng 10 000–200 000
Da cho thấy urease đậu nành Việt Nam có một loại chuỗi tiểu đơn vị trọng lượng khoảng 17000
Da. Các thông số động học của urease đậu nành Việt Nam xác định theo phương trình
Lineweaver – Burk là Km = 5.3 mM và Vmax = 6.77*10-3 mM/phút.
1. MỞ ĐẦU
Urease là một loại enzym thuỷ phân ure hình thành NH3 và CO2, được ứng dụng rất nhiều
trong Y học và Công nghiệp thực phẩm để định lượng ure trong các mẫu bệnh phẩm và nước
chấm. Trên thế giới, có rất nhiều nhà khoa học nghiên cứu về enzym urease và và các đặc tính
của chúng, tuy nhiên các bài nghiên cứu về urease từ các nguồn nguyên liệu đậu khác nhau cho
các kết quả khác nhau về đặc tính urease. Điều này chứng tỏ urease từ các nguyên liệu đậu khác
nhau có thể có một số khác biệt về tính chất. Còn ở Việt Nam chỉ mới có các nghiên cứu để tinh
sạch urease, hoàn toàn chưa có tác giả nào nghiên cứu nào về các đặc tính urease từ nguyên liệu
đậu nành Việt Nam.
Để có thể ứng dụng urease trong Y học và Thực Phẩm hiệu quả rất cần thiết phải nắm được
các đặc tính urease.ở nước ta hiện nay vẫn phải nhập chế phẩm urease và kit urease từ nước
ngoài với giá thành rất cao. Do đó chúng tôi thực hiện đề tài này nhằm tìm ra một số đặc tính
urease đậu nành hạt vàng Việt Nam: phân tử lượng của urease và chuỗi tiểu đơn vị, các thông số
động học của urease.