Luận Văn XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH CÂY ĐU ĐỦ (Carica papaya L.) BẰNG KỸ THUẬT PCR VỚI CÁC CẶP PRIMER ĐƢỢC THIẾT KẾ

TÓM TẮT


“XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH CÂY ĐU ĐỦ


(Carica papaya L.) BẰNG KỸ THUẬT PCR VỚI CÁC CẶP PRIMER ĐưỢC


THIẾT KẾ DỰA VÀO VÙNG DNA LIÊN KẾT VỚI GEN QUY ĐỊNH GIỚI TÍNH


TRÊN NHIỄM SẮC THỂ GIỚI TÍNH”.


Nội dung thực hiện:


­ Khảo sát quy trình nhiệt để tìm ra quy trình nhiệt thích hợp cho các


cặp primer T1, W11.


­ Thực hiện PCR trên mẫu DNA tổng số của mẫu lá đu đủ với từng cặp


primer T1, W11.


­ Thực hiện multiplex PCR với các cặp primer T1, W11.


Kết quả đạt được:


Đã tìm được quy trình nhiệt ổn định cho các cặp primer T1, W11. Kết


quả PCR: trên cây lưỡng tính sản phẩm PCR thu được có kích thước là


0,8 kb và 1,5 kb. Trên cây cái sản phẩm PCR thu được là 0,8 kb. Trên


đực không có sản phẩm PCR. Như vậy, đã nhận biết được giới tính của


cây đu đủ.


MỤC LỤC


CHưƠNG TRANG


Trang tựa


Lời cảm ơn iii


Tóm tắt .iv


Mục lục .v


Danh sách các chữ viết tắt vii


Danh sách các hình . viii


Danh sách các bảng .ix


PHẦN 1. MỞ ĐẦU .1


1.1. Đặt vấn đề .1


1.2. Mục đích đề tài 2


1.3. Đối tượng nghiên cứu .2


PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3


2.1. Giới thiệu về cây đu đủ .3


2.1.1. Phân loại 3


2.1.2. Nguồn gốc, phân bố .3


2.1.3. Đặc điểm hình thái .4


2.1.4. Các giống đu đủ hiện nay 7


2.1.5. Giới tính cây đu đủ 8


2.1.6. Di truyền học giới tính cây đu đủ 8


2.1.7. Yêu cầu ngoại cảnh .10


2.1.8. Giá trị dinh dưỡng và ý nghĩa kinh tế 11


2.1.9. Tình hình sản xuất và trồng trọt 12


2.2. Kỹ thuật PCR 13


2.2.1. Lịch sử PCR .13


2.2.2. Nguyên tắc PCR 14


2.2.3. Các thành phần của phản ứng PCR .14


2.2.4. ưu điểm và nhược điểm của PCR .17


2.2.5. Nguyên tắc xác định giới tính cây đu đủ .18


2.3. Một số nghiên cứu trong nước và ngoài nước 18


PHẦN 3. VẬT LIỆU VÀ PHưƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .22


3.1. Địa điểm và thời gian .22


3.1.1. Địa điểm. .22


3.1.2. Thời gian 22


3.2. Vật liệu và thiết bị 22


3.2.1. Hóa chất .22


3.2.2. Thiết bị và dụng cụ 22


3.3. Phương pháp nghiên cứu 23


3.3.1. Phương pháp lấy mẫu ở trại thực nghiệm .23


3.3.2. Ly trích DNA từ lá đu đủ bằng phương pháp CTAB 23


3.3.3. Thực hiện phản ứng PCR 25


3.3.4. Điện di sản phẩm PCR 28


PHẦN 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .29


4.1. Kết quả ly trích DNA .29


4.2. Kết quả PCR với cặp primer T1 .30


4.2.1. Quy trình nhiệt 1 30


4.2.2. Quy trình nhiệt 2 31


4.2.3. Quy trình nhiệt 3 31


4.2.4. Quy trình nhiệt 4 32


4.3. Kết quả PCR với cặp primer W11 33


4.4. Kết quả PCR với 2 cặp primer T1 và W11 34


PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .35


5.1. Kết luận .35


5.2. Đề nghị .35


TÀI LIỆU THAM KHẢO .36