Luận Văn Xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên một số giống heo công nghiệp bằng kỹ thuật pcr - rflp

TÓM TẮT KHÓA LUẬN​

“ Xác định sự hiện diện của các kiểu gen Prolactin receptor trên một số giống heo công nghiệp bằng phương pháp PCR-RFLP ”. Hội đồng hướng dẫn: TS VÕTHỊ TUYẾT KS BÙI THỊ TRÀ MI Gen thụ thể prolactin (PRLR) là gen đánh dấu có liên quan đến tính trạng sinh sản trên heo. Từ những kết quả nghiên cứu trong những năm gần đây trên thế giới cho thấy gen này thực sự có ảnh hưởng đến số con đẻ ra và số con còn sống trên heo. Để tiếp tục nghiên cứu về vấn đề này, đề tài “Xác định sự hiện diện của các kiểu gen Prolactin receptor trên một số giống heo công nghiệp bằng phương pháp PCR-RFLP” được tiến hành từ ngày 6 tháng 2 năm 2006 đến ngày 3 tháng 7 năm 2006 trên đàn nái Y, L, D thuần của XNCN heo giống Đồng Hiệp. Các kết quả thu được: + Ở nhóm heo thuộc giống L được khảo sát, 3 kiểu gen của PRLR đều xuất hiện với tần số kiểu gen BB cao nhất là 20/48 (47,46 %), AB là 19/20 (35,59%), và AA là 9/48 (16,95 %). Trên nhóm heo Y, tỷ lệ mẫu thành công 11/23. Trong đó kiểu gen BB chiếm 8/11(72,73 %) mẫu, kế đến là AB 2/11 (18,18 %), và cuối cùng là AA 1/11 (9,09 %). + Phân tích mối liên quan của từng kiểu gen của giống heo L với năng suất sinh sản cho thấy nái mang kiểu gen BB có trung bình số con trên ổ cao (11,59 ± 2,83 con/ổ), nái mang kiểu gen AB là 11,11 ± 3,31 con/ổ, và nái mang kiểu gen AA là 10,84 ± 3,06 con/ổ. Đây là sự khác biệt có ý nghĩa. Có thể nói những con nái có kiểu gen BB thì có năng suất sinh sản cao hơn những con nái có kiểu gen khác.

MỤC LỤC​

TRANG
Trang tựa
Xác nhận của giáo viên iii
Lời cảm ơn . iv
Tóm tắt khóa luận v
Abstract vi
Mục lục vii
Danh sách các chữ viết tắt . x
Danh sách các bảng . xi
Danh sách các hình xii
PHẦN I. MỞ ĐẦU 1
1.1 Đặt vấn đề 1
1.2 Mục đích của đề tài 2
1.3 Yêu cầu .2
PHẦN II. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3
2.1 Sơ lược tình hình chăn nuôi heo nái sinh sản ở Xí nghiệp chăn nuôi heo Đồng Hiệp .3
2.1.1 Lịch sử của Xí nghiệp .3
2.1.2 Vị trí địa lí .3
2.2 Đặc điểm con giống .3
2.2.1 Heo Yorkshire .3
2.2.2 Heo Landrace .4
2.2.3 Heo Duroc .4
2.3 Năng suất sinh sản 5
2.4 Những yếu tố ảnh hưởng đến thành tích sinh sản của heo nái .6
2.5 Giới thiệu vật liệu di truyền .6
2.5.1 Lịch sử nghiên cứu và thành tựu của di truyền học và kỹ thuật gen 6
2.5.2 Acid nucleic là vật liệu di truyền .7
vi ii
2.5.3 Cấu trúc và đặc điểm của DNA .8
2.5.4 Cơ chế tự nhân đôi của DNA 9
2.5.5 Sự biến tính và hồi tính của DNA .11
2.5.6 Phương pháp tách chiết DNA 11
2.6 Kỹ thuật PCR .11
2.6.1 Nguyên tắc .11
2.6.2 Các yếu tố ảnh hưởng 12
2.6.2.1 DNA mẫu 12
2.6.2.2 Dung dịch đệm 12
2.6.2.3 Taq DNA polymerase .12
2.6.2.4 Các nucleotide (dNTP) .13
2.6.2.5 Các chu kì phản ứng .13
2.6.2.6 Nhiệt độ và pH 13
2.6.2.7 Các vấn đề thường gặp trong PCR và phương pháp khắc phục .14
2.6.2.8 Các enzyme cắt giới hạn .15
2.6.2.9 Ứng dung của kỹ thuật PCR .15
2.7 Kỹ thuật PCR-RFLP 16
2.7.1 Nguyên tắc .16
2.7.2 Ứng dụng .16
2.8 Gen prolactin 17
2.8.1 Nguồn gốc và cấu tạo 17
2.8.2 Tác dụng của prolactin 17
2.8.3 Cơ chế tác động của prolactin .17
2.8.4 Gen thụ thể prolactin .18
2.8.5 Tính đa hình của gen prolactin 19
2.8.5.1 Tính đa hình của gen 19
2.8.5.2 Tính đa hình của gen thụ thể prolactin .20
PHẦN III. NỘI DUNG VÀ PHưƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21
3.1 Thời gian và địa điểm .21
3.2 Đối tượng khảo sát .21
3.3 Nội dung thực hiện .21
3.4 Phương pháp nghiên cứu 21
ix
3.4.1 Vật liệu, dụng cụ, máy móc và thiết bị làm thí nghiệm 21
3.4.2 Thu thập mẫu .22
3.4.3 Ly trích DNA .22
3.4.3.1 Ly trích DNA từ mẫu da tai 22
3.4.3.2 Định lượng DNA bằng quang phổ kế .23
3.4.3.3 Khuyếch đại mẫu và cắt bằng enzyme giới hạn .23
3.4.4.3 Điện di trên gel agarose 25
3.4.4.4 Đọc kết quả điện di .26
3.4.4.5 Thu thập số liệu về năng suất .26
3.5 Các chỉ tiêu theo dõi .26
PHẦN IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .27
4.1 Đánh giá quy trình ly trích DNA từ mẫu da tai .27
4.2 Tỷ lệ thành công của phản ứng PCR 28
4.3 Tỷ lệ thành công khi xử lý enzyme cắt và tần số xuất hiện của các kiểu gen của gen thụ thể prolactin .30
4.4 Năng suất sinh sản của nái ứng với các kiểu gen của gen PRLR 32
PHẦN V. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 36
PHẦN VI. TÀI LIỆU THAM KHẢO .38
PHỤ LỤC