Luận Văn ứng dụng kỹ thuật pcr phát hiện wssv trong mẫu tôm sú (penaeus monodon)

ĐỀ TÀI: ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR PHÁT HIỆN WSSV TRONG MẪU TÔM SÚ (Penaeus monodon)



MỤC LỤC​

PHẦN I: GIỚI THIỆU 1

PHẦN II: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU . 3

2.1 Sơ lược về tình hình nuôi và dịch bệnh trên tôm biển . 3

2.1.1 Trên thế giới 3

2.1.2 Ở Việt Nam . 4

2.2 Sơ lược về bệnh đốm trắng . 6

2.2.1 Tác nhân gây bệnh . 7

2.2.2 Dấu hiệu bệnh lý . 7

2.2.3 Loài và giai đoạn cảm nhiễm . 8

2.2.4. Phân bố 8

2.2.5. Phương thức lây nhiễm . 9

2.2.6 Chẩn đoán bệnh . 9

2.2.7 Phòng bệnh 10

2.3 Kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) 10

2.3.1 Các chỉ tiêu ảnh hưởng đến phản ứng PCR 12

2.3.2 Ưu nhược điểm của kỹ thuật PCR 13

2.3.3 Một số nghiên cứu liên quan đến tối ưu hóa qui trình PCR 14

PHẦN III: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16

3.1 Địa diểm và thời gian thực hiện 16

3.1.1 Địa điểm . 16

3.1.2 Thời gian thực hiện . 16

3.2 Mẫu vật, dụng cụ và hóa chất nghiên cứu . 16

3.2.1 Mẫu vật 16

3.2.2 Dụng cụ và hóa chất . 16

3.3 Phương pháp nghiên cứu . 17

3.3.1 Phương pháp đo hàm lượng ADN 17

3.3.2 Phương pháp PCR phát hiện WSSV 17

3.3.3 Phương pháp PCR phát hiện WSSV và nội chuẩn (ADN của giáp xác mười chân- decapod) . 19

PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN . 21

4.1 Tối ưu qui trình PCR phát hiện WSSV (sử dụng cặp mồi do Kimura et al, 1996 thiết kế) 21

4.1.1 Chu kỳ nhiệt 22

4.1.2 Nồng độ Taq polymerase . 23

4.1.3 Nồng độ mồi 24

4.1.4 Nồng độ MgCl2 25

4.1.5 Mức độ phát hiện mẫu 26

4.2 Tối ưu qui trình PCR phát hiện WSSV và nội chuẩn (ADN của giáp xác mười chân - decapod) . 27

PHẦN V: KẾT LUẬN ĐỀ XUẤT . 34

5.1 Kết luận 34

5.2 Đề xuất 34

TÀI LIỆU THAM KHẢO 35

PHỤ LỤC . 40