Luận Văn ứng dụng kỹ thuật PCR để xác định Listeria monocytogenes trong thực phẩm thủy sản

Thủy sản là một trong những ngành đóng góp vào nguồn thu ngoại tệ nhiều nhất nước ta, thế nhưng trong nhưng năm gần đây mặt hàng này đang gặp khó khăn về thị trường xuất khẩu do vấn đề vệ sinh an toàn thực phẩm còn chưa tốt, trong đó các trường hợp bị nhiễm khuẩn Listeria monocytogenes bị phát hiện ngày càng gia tăng, năm 2007 khi phân tích loại vi khuẩn này trên sản phẩm cá tra đông lạnh thì có tới 21.5% cho kết quả dương tính, và tăng lên 30.36% vào năm 2008. với đặc tính gây ra nhiều bệnh nguy hiểm trên người như gây nhiễm trùng máu, viêm màng não ở trẻ em, đối với phụ nữ mang thai thì dễ bị sảy thai, để non và trẻ chết sau khi sinh , Listeria monocytogenes đã trở thành mối quan tâm lớn của khách hàng và các trung tâm kiểm tra chất lượng trên thế giới.
Hiện nay có nhiều phương pháp được ứng dụng để xác định Listeria monocytognens trong thực phẩm. Trong đó có các phương pháp truyền thống như: ISO 11290- 1:2004, BAM-FDA, USDA, ALOA có thể định danh Listeria.momocytogenes trong thực phẩm bao gồm nhiều bước phức tạp như tăng sinh, phân lập trên môi trường chọn lọc và dùng các thử nghiệm hóa sinh để dịnh danh. Các phương pháp truyền thống này cần nhiều thời gian thực hiện từ ba đến bốn ngày cho các trường hợp âm tính và năm đến bảy ngày cho trường hợp dương tính. Do hạn chế này mà dẫn đến nhiều khó khăn, bất tiện trong hoạt động sản xuất kèm theo sản phẩm bị tổn thất và giảm chất lượng vì phải lưu kho trong thời gian dài để đợi kết quả phân tích. Hiện nay đang phát triển các phương pháp hiện đại như phương pháp miễn dịch ELISA, phương pháp phân tích nhanh RAPID`Lmono, .để phát hiện nhanh Listeria monocytogenes.
Khi tìm ra được gen đặc hiệu cho Listeria monocytogenes thì việc ứng dụng kỹ thuật PCR trong xác định Listeria monocytogenes đang có nhiều triển vọng có thể rút ngắn được thời gian xét nghiệm xuống còn từ 2-3 ngày trong khi đó có độ tin cậy cao và dễ thực hiện, từ đó mà khác phục được hạn chế lớn nhất của phương pháp ISO 11290- 1:2004. Do đó chúng tôi tiến hành nghiên cứu về “ ứng dụng kỹ thuật PCR để xác định Listeria monocytogenes trong thực phẩm thủy sản”.