Đồ Án Thử nghiệm phân lập và tạo dòng nguyên bào sợi từ mô phôi thai người

MỤC LỤC
GIỚI THIỆU VỀ ĐỀ TÀI
1. ĐẶT VẤN ĐỀ 1
2. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU .4

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU.
1. LƯỢC SỬ NUÔI CẤY TẾ BÀO. 5
2. LƯỢC SỬ NUÔI CẤY NGUYÊN BÀO SỢI .6
2.1. Ở VIỆT NAM : 6
2.2. SƠ LƯỢC VỀ KINH NGHIỆM NUÔI CẤY NGUYÊN BÀO SỢI TRÊN THẾ GIỚI 6
3. CÁC NGUỒN MÔ DÙNG ĐỂ NUÔI CẤY NGUYÊN BÀO SỢI. 12
3.1. Ở GIAI ĐOẠN PHÔI THAI 12
3.2. Ở GIAI ĐOẠN SAU SINH .12
3.3. ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI – TÍNH CHẤT CHỨC NĂNG CỦA NGUYÊN BÀO SỢI. 13
3.3.1. ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI CỦA NGUYÊN BÀO SỢI .13
3.3.2. CHỨC NĂNG CỦA NGUYÊN BÀO SỢI. 14
3.3.3. KHẢ NĂNG BIỆT HÓA VÀ TÁI BIỆT HÓA
CỦA NGUYÊN BÀO SỢI. 15
3.3.4. NGUYÊN BÀO SỢI – ĐẦU MỐI TẠO RA MỠ, SẸO VÀ SỰ VIÊM 17
3.3.5. KHẢ NĂNG GÓP PHẦN SỬA CHỬA VẾT THƯƠNG, TÁI TẠO MÔ BỊ TỔN THƯƠNG CỦA NGUYÊN BÀO 19
3.3.6. NGUYÊN BÀO SỢI - SẢN XUẤT NHÂN TỐ TĂNG TRƯỞNG, CẢM ỨNG BIỆT HÓA. 23
3.3.7 NGUYÊN BÀO SỢI - CHỨC NĂNG TIẾP LIỆU, CHẾ TIẾT COLLAGENE, LÀM GIÁ THỂ THU NHẬN TẾ BÀO MẦM 24
3.4. SỰ LIÊN HỆ GIỮA NGUYÊN BÀO SỢI VÀ TẾ BÀO TRUNG MÔ. 25
4. TRỨNG LÀM TỔ BÌNH THƯỜNG 26
5. TRỨNG LÀM TỔ BẤT THƯỜNG (LẠC CHỖ) .27
6. CÁC PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY SƠ CẤP 29
7. PHƯƠNG PHÁP CẤY CHUYỀN – TẠO DÒNG, THU NHẬN VÀ LƯU TRỮ DÒNG TẾ BÀO MỤC TIÊU 30
7.1. CẤY CHUYỀN TẾ BÀO 30
7.2. TẠO VÀ THU NHẬN DÒNG TẾ BÀO MỤC TIÊU TRÊN MÔI TRƯỜNG THẠCH BẰNG VÒNG RINGS 31
7.3. BẢO QUẢN TẾ BÀO .32
7.4. HOẠT HÓA TẾ BÀO .32
8. CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN QUÁ TRÌNH NUÔI CẤY 32
8.1 MÔI TRƯỜNG VÀ CÁC YẾU TỐ BỔ SUNG .32
8.2 YẾU TỐ BỀ MĂT CỦA CHAI NUÔI - GIÁ THỂ .33
8.3 YẾU TỐ VẬT LÝ. 34
8.3 .1. ÁP SUẤT THẨM THẤU .34
8.3 .2. NHIỆT ĐỘ 34
8.3.3. TÍNH NHỚT 35
8.3 .4 ÁP LỰC SỨC CĂNG BỀ MẶT VÀ SỰ TẠO BỌT .35
8.4. YẾU TỐ HÓA HỌC 35
8.4.1. OXYGEN 35
8.4.2. CO2 36
8.4.3. PH 36
8.4.4. DUNG DỊCH ĐỆM .37
8.5. MÔI TRƯỜNG TỦ NUÔI 37
9. TỈ LỆ MÔI TRƯỜNG VỚI MẬT ĐỘ TẾ BÀO ĐEM NUÔI, LƯỢNG MÔ ĐEM CẤY 38
10. MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY .38
10.1. MÔI TRƯỜNG 38
10.2 MỘT VÀI LOẠI MÔI TRƯỜNG THƯỜNG ĐƯỢC SỬ DỤNG
TRONG NUÔI CẤY TẾ BÀO VÀ MÔ ĐỘNG VẬT .39
11. TIỀM NĂNG ỨNG DỤNG CỦA NGUYÊN BÀO SỢI 41

CHƯƠNG II: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .
1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU .43
2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .43
2.1. THIẾT KẾ NGHIÊN CỨU .43
2.2. CÁC MỤC TIÊU CẦN KHẢO SÁT .43
3. TRÌNH TỰ THÍ NGHIỆM 44
4. CÁC QUI TRÌNH CHÍNH ĐƯỢC SỬ DỤNG TRONG TIẾN TRÌNH THÍ NGHIỆM .45
4.1. VÔ TRÙNG DỤNG CỤ HÓA CHẤT .45
4.2. VÔ TRÙNG NƠI TẾN HÀNH THÍ NGHIỆM 45
4.3. CÁC QUY TRÌNH CHUNG XỬ LÝ MẪU THÍ NGHIỆM 46
4.4. CÁC QUY TRÌNH CỤ THỂ CHO NUÔI CẤY(CÁC PROTOCOLS) .48
4.5. TIÊU CHUẨN CHỌN MẪU MÔ THÍ NGHIỆM .54
4.6. TIÊU CHUẨN ĐÁNH GIÁ CHỌN NGUỒN MÔ MỤC TIÊU 55
4.7. TIÊU CHUẨN LOẠI TRỪ MẪU MÔ THÍ NGHIỆM 55
4.8. TIÊU CHUẨN ĐÁNH GIÁ PHƯƠNG PHÁP,MÔI TRƯỜNG ĐỂ LOẠI TRỪ 56
4.9. CÁC YẾU TỐ CẦN NGHIÊN CỨU 56
4.10. SỐ LẦN THÍ NGHIỆM. 57
4.11. KỸ THUẬT NGHIÊN CỨU
VÀ PHƯƠNG PHÁP THU THẬP SỐ LIỆU 57
4.12. PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU. 57

5. PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU. 58
5.1. THIẾT BỊ . 58
5.2. DỤNG CỤ. 59
5.3. HOÁ CHẤT . 61

CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN.
I. KẾT QUẢ 63
1. KẾT QUẢ GHI NHẬN TRONG
CÁC ĐỢT NUÔI CẤY 63
1.1. KẾT QUẢ NUỐI CẤY SƠ CẤP. 63
1.2. KẾT QUẢ NUÔI CẤY THỨ CẤP – CẤY CHUYỀN 65
1.3. HÌNH ẢNH GHI NHẬN ĐƯỢC TRONG CÁC ĐỢT NUÔI CẤY. 66
2. SỐ LIỆU VÀ HÌNH ẢNH GHI NHẬN ĐƯỢC SAU KHI CẤY CHUYỀN .68
2.1. BẢNG SỐ LIỆU, VÀ HÌNH ẢNH (NGÀY 14/6) 68
2.2. BẢNG SỐ LIỆU, VÀ HÌNH ẢNH (NGÀY 15/6) .69
2.3. BẢNG SỐ LIỆU, VÀ HÌNH ẢNH (NGÀY 16/6) .71
2.4. BẢNG SỐ LIỆU, VÀ HÌNH ẢNH (NGÀY 17/6) .72
2.5. BẢNG SỐ LIỆU, VÀ HÌNH ẢNH (NGÀY 18/6) .74
2.6. BẢNG SỐ LIỆU, VÀ HÌNH ẢNH (NGÀY 21/6) .75
II. BÀN LUẬN .76
1. SO SÁNH BẢNG SỐ LIỆU TRÊN CÙNG MÔI TRƯỜNG 76
2. SO SÁNH BẢNG SỐ LIỆU GIỬA CÁC MÔI TRƯỜNG 79
3. NHỮNG ĐIỂM KHÁC BIỆT CỦA CÁC LOẠI MÔI TRƯỜNG ẢNH HƯỠNG ĐẾN KẾT QUẢ NUÔI 81
4. LÝ DO LỰA CHỌN PHƯƠNG PHÁP VÀ KẾT LUẬN
MÔI TRƯỜNG TỐI ƯU TRONG BA MÔI TRƯỜNG SỬ DỤNG 82
5. CÁC YẾU TỐ LIÊN QUAN ẢNH HƯỞNG ĐẾN KẾT
Section 1.01 QUẢ TIẾN TRÌNH THÍ NGHIỆM 85
6. NHỮNG THUẬN LỢI TRONG TIẾN TRÌNH THÍ NGHIỆM .86
7. SO SÁNH HÌNH DẠNG CÁC LOẠI TẾ BÀO
DẠNG NGUYÊN BÀO SỢI 87

CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
I. KẾT LUẬN 93
II. KIẾN NGHỊ .94