Tiến Sĩ Phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất có hoạt tính sinh học từ nấm tổ ong lông thô (Hexagonia a

1



LỜI CẢM ƠN

Luận án được thực hiện tại các phòng thí nghiệm chuyên đề Hoá hữu cơ - khoa
Hoá, phòng thí nghiệm Trung tâm Phân tích thực phẩm và Môi trường, Trường Đại học
Vinh, Viện Hoá học-Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam, khoa Công nghệ
sinh học, Đại học quốc gia Formosa, khoa Hóa-Đại học Quốc gia Cheng Kung, Đài
Loan.
Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc nhất đến PGS TS Trần Đình
Thắng - Trường Đại học Vinh, PGS. TS Ping-Chung Kuo-Đại học quốc gia Formosa
(Đài Loan) là người những thầy đã giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện tốt nhất,
giúp tôi từng bước trong quá trình thực hiện luận án.
Tôi xin chân thành cảm ơn PGS. TS Nguyễn Hoa Du, PGS. TS Hoàng Văn Lựu
đã tạo điều kiện thuận lợi, động viên tôi trong quá trình làm luận án. Tôi cũng bày tỏ
lòng biết ơn GS. TS Tian-Shung Wu-Đại học Quốc gia Cheng-Kung, Đài Loan giúp
đánh giá kết quả.
PGS. TS. Ngô Anh khoa Sinh, Đại học Khoa học Huế giúp định danh mẫu nấm.
Nhân dịp này, tôi cũng xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu, các phòng ban
chức năng, các thầy cô, cán bộ khoa Đào tạo Sau đại học, khoa Hoá học Trường Đại
học Vinh, các bạn đồng nghiệp, học viên cao học, sinh viên, gia đình và người thân đã
động viên và giúp đỡ tôi hoàn thành luận án này.
Vinh, ngày 15 tháng 07 năm 2015




Nguyễn Thị Bích Ngọc
1



MỤC LỤC
Trang
Mở đầu 1
1. Lý do chọn đề tài 1
2. Đối tượng nghiên cứu 2
3. Nhiệm vụ nghiên cứu 3
4. Phương pháp nghiên cứu 3
5. Những đóng góp mới của luận án 3
6. Cấu trúc của luận án 4
Chương 1: Tổng quan 5
1.1. Chi Ganoderma (Linh chi) 5
1.1.1. Đặc điểm hình thái cơ bản và phân loại nấm linh chi 5
1.1.2. Các hợp chất có hoạt tính sinh học được phân lập từ nấm linh chi
(Ganoderma lucidum)
6
1.1.2.1. Lanostanoit tritecpenoit 7
1.1.2.2. Ganoderma polysaccarit 15
1.1.2.3. Peptit và protein 17
1.2. Chi Hexagonia 22
1.2.1. Đặc điểm chung về hình thái 22
1.2.2. Thành phần hóa học 23
1.3. Nấm tổ ong lông thô (Hexagonia apiaria) 24
1.3.1. Đặc điểm hình thái và phân bố 24
1.3.2. Thành phần hoá học và hoạt tính sinh học 25
1.4. Nấm linh chi (Ganoderma pfeifferi) 25
1.4.1. Đặc điểm hình thái và phân bố 25
1.4.2. Thành phần hóa học 26
1.4.3. Hoạt tính sinh học 28
1.5. Nấm linh chi đen bóng (Ganoderma mastoporum) 28
1.5.1. Đặc điểm hình thái và phân bố 28
1.5.2. Thành phần hóa học 29
1.5.3. Hoạt tính sinh học 29
2



Chương 2: Phương pháp và thực nghiệm 30
2.1. Phương pháp nghiên cứu 30
2.1.1. Các phương pháp xử lý mẫu và chiết 30
2.1.2. Các phương pháp phân tích, phân tách các hỗn hợp và phân lập các hợp chất 30
2.1.3. Phương pháp khảo sát cấu trúc các hợp chất 30
2.2. Hóa chất và thiết bị 30
2.2.1. Hoá chất 30
2.2.2. Dụng cụ và thiết bị 31
2.3. Nghiên cứu các hợp chất từ nấm tổ ong lông thô (Hexagonia apiaria) 31
2.3.1. Thu mẫu 31
2.3.2. Chiết xuất, phân lập, xác định cấu trúc các hợp chất phân lập được 31
2.3.3. Các dữ liệu vật lý và phổ 33
2.3.3.1. Hexagonin A (HAM 1) 33
2.3.3.2. Hexagonin B (HAM 2) 35
2.3.3.3. Hexagonin C (HAM 3) 35
2.3.3.4. Hexagonin D (HAM 4) 36
2.3.3.5. Hexagonin E (HAM 5) 37
2.3.3.6. Hexatenuin A (HAM 6) 37
2.3.3.7. Axit ursolic (HAM 7) 38
2.3.3.8. Ergosterol (HAM 8) 39
2.4. Nghiên cứu các hợp chất từ nấm linh chi (Ganoderma pfeiferi) 40
2.4.1. Thu mẫu 40
2.4.2. Chiết xuất, phân lập, xác định cấu trúc các hợp chất phân lập được 40
2.4.3. Các dữ liệu vật lý và phổ 41
2.4.3.1. Ergosterol (GPM 1) 41
2.4.3.2. Ergosterol peroxit (GPM 2) 41
2.4.3.3. Axit 3β-hydroxy-5α-lanosa-7,9,24(E)-trien-26-oic (GCM3) 41
2.4.3.4. Ganodermadiol (GPM 4) 41
2.4.3.5. Axit 7-oxo-ganoderic Z (GPM 5) 42
2.4.3.6. Cerevisterol (GPM 6) 44
2.5. Nghiên cứu các hợp chất phân lập từ nấm linh chi đen bóng
(Ganoderma mastoporum)
44

3



2.5.1. Thu mẫu 44
2.5.2. Chiết xuất, phân lập, xác định cấu trúc các họp chất phân lập được 45
2.5.3. Các dữ liệu vật lý và phổ 45
2.5.3.1. ∆ 1
-Lupenon (GCM 1) 45
2.5.3.2. Ergosta -7,22-dien-3β-ol (GCM 2) 46
2.5.3.3. Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-on (GCM 3) 46
2.5.3.4. Ergosterol peroxit (GCM 4) 47
2.5.3.5. Ganodermanondiol (GCM 5) 47
2.5.3.6. Lucidumol B (GCM 6) 47
2.5.3.7. Ergosta-7,22-dien-3-on (GCM 7) 48
2.5.3.8. 3β,5α-dihydroxy-(22E,24R)-Ergosta-7,22-dien-6-on (GCM 8) 48
Chương 3: Kết quả và thảo luận 50
3.1. Nấm tổ ong lông thô (Hexagonia apiaria) 50
3.1.1. Phân lập hợp chất 50
3.1.2. Xác định cấu trúc 50
3.1.2.1. Hợp chất HAM 1 (Hexagonin A) 50
3.1.2.2. Hợp chất HAM 2 (Hexagonin B) 58
3.1.2.3. Hợp chất HAM 3 (Hexagonin C) 66
3.1.2.4. Hợp chất HAM 4 (Hexagonin D) 71
3.1.2.5. Hợp chất HAM 5 (Hexagonin E) 74
3.1.2.6. Hợp chất HAM 6 (Hexatenuin A) 79
3.1.2.7. Hợp chất HAM 7 (Ergosterol) 86
3.1.2.8. Hợp chất HAM 8 (Axit ursolic) 88
3.1.2.9. Hợp chất HAM 9 (Ergosterol peroxit) 91
3.1.3. Thử hoạt tính sinh học 93
3.2. Nấm linh chi (Ganoderma pfeiferi) 95
3.2.1. Phân lập một số hợp chất 95
3.2.2. Xác định cấu trúc 95
3.2.2.1. Hợp chất GPM1 95
3.2.2.2. Hợp chất GPM2 95
3.2.2.3. Hợp chất GPM3 95
3.2.2.4. Hợp chất GPM4 97
4



3.2.2.5. Hợp chất GPM5 99
3.2.2.6. Hợp chất GPM6 102
3.2.3 Thử hoạt tính sinh học 104
3.3. Nấm linh chi đen bóng (Ganoderma mastoporum) 105
3.3.1. Phân lập một số hợp chất 105
3.3.2. Xác định cấu trúc 106
3.3.2.1. Hợp chất GCM1 106
3.3.2.2. Hợp chất GCM2 107
3.3.2.3. Hợp chất GCM3 108
3.3.2.4. Hợp chất GCM4 109
3.3.2.5. Hợp chất GCM5 109
3.3.2.6 Hợp chất GCM6 110
3.3.2.7. Hợp chất GCM7 112
3.3.2.8. hợp chất GCM8 113
3.3.3. Thử hoạt tính sinh học 114
Kết luận 119
Danh mục công trình liên quan đến luận án 120
Tài liệu tham khảo 121
Phụ lục 136

1




DANH SÁCH BẢNG

Trang
Bảng 3.1. Các hợp chất được tách ra từ loài nấm tổ ong lông thô 50
Bảng 3.2: Số liệu phổ NMR của hợp chất HAM1 56
Bảng 3.3: Số liệu phổ NMR của hợp chất HAM2 64
Bảng 3.4: Số liệu phổ
1
H-NMR của chất HAM3 69
Bảng 3.5: Số liệu phổ
1
H-NMR của chất HAM4 72
Bảng 3.6: Số liệu phổ NMR của chất HAM5 78
Bảng 3.7: Số liệu phổ NMR của hợp chất HAM6 84
Bảng 3.8: Số liệu phổ NMRcủa hợp chất HAM7 87
Bảng 3.9: Số liệu phổ NMR của hợp chất HAM8 89
Bảng 3.10: Số liệu phổ NMR của hợp chất HAM9 92
Bảng 3.11: Tác dụng ức chế của hợp chất từ (H. apiaria) 94
Bảng 3.12: Các hợp chất được tách ra từ nấm linh chi (G. pfeiferi) 95
Bảng 3.13: Số liệu phổ
13
C-NMR, DEPT của hợp chất GPM3 96
Bảng 3.14: Số liệu phổ của hợp chất GCM4 98
Bảng 3.15: Dữ liệu phổ NMR của hợp chất GPM5 100
Bảng 3.16: Dữ liệu phổ NMR của hợp chất GPM6 103
Bảng 3.17: Kết quả thử nghiệm hoạt tính kháng viêm 104
Bảng 3.18: Các hợp chất được tách ra từ nấm linh chi đen bóng 105
Bảng 3.19: Số liệu phổ
1
H-NMR của hợp chất GCM1 106
Bảng 3.20: Số liệu phổ
1
H-NMR của hợp chất GCM2 107
Bảng 3.21: Số liệu phổ
1
H-NMR của hợp chất GCM3 108
Bảng 3.22: Số liệu phổ
1
H-NMR của hợp chất GCM5 110
Bảng 3.23: Số liệu phổ
1
H-NMR của hợp chất GCM6 111
Bảng 3.24: Số liệu phổ
1
H-NMR của hợp chất GCM7 112
Bảng 3.25: Số liệu phổ
1
H-NMR của hợp chất GCM8 113
Bảng 3.26: Tác dụng ức chế của hợp chất từ nấm linh chi đen bóng 114
2





DANH SÁCH HÌNH

Trang
Hình 1.1. Nấm H.apiaria mặt trước và mặt sau 22
Hình 1.2. G. pfeifferi non 26
Hình 1.3. G. pfeifferi lâu năm 26
Hình 1.4. Bề mặt dưới của quả thể G. pfeifferi 26
Hình 1.5. Nấm linh chi đen bóng (G. mastoprum) 28
Hình 3.1: Phổ khối lượng của hợp chất HAM1 51
Hình 3.2: Phổ IR của hợp chất HAM1 51
Hình 3.3: Phổ 13
C-NMR của hợp chất HAM1 52
Hình 3.4: Phổ DEPT của hợp chất HAM1 53
Hình 3.5: Phổ HSQC của hợp chất HAM1 53
Hình 3.6: Phổ HSQC của hợp chất HAM1 54
Hình 3.7: Phổ 1
H-NMR của hợp chất HAM1 55
Hình 3.8: Phổ HMBC của hợp chất HAM1 56
Hình 3.9: Công thức HMBC của hợp chất HAM1 56
Hình 3.10: Phổ khối lượng HR-ESI-MS của hợp chất HAM2 59
Hình 3.11: Phổ IR của hợp chất HAM2 59
Hình 3.12: Phổ 13
C-NMR của hợp chất HAM2 60
Hình 3.13: Phổ DEPT của hợp chất HAM2 61
Hình 3.14: Phổ 1
H-NMR của hợp chất HAM2 62
Hình 3.15: Phổ HSQC của hợp chất HAM2 62
Hình 3.16: Phổ HSQC dãn của hợp chất HAM2 63
Hình 3.17: Phổ HMBC của hợp chất HAM2 63
Hình 3.18: Phổ COSY của hợp chất HAM2 64
Hình 3.19: Phổ khối lượng của hợp chât HAM3 66
Hình 3.20: Phổ 13
C-NMR của hợp chất HAM3 67
Hình 3.21: Phổ 13
C-NMR của hợp chất HAM3 67
3



Hình 3.22: Phổ HSQC của hợp chất HAM3 68
Hình 3.23: Phổ HMBC của hợp chất HAM3 68
Hình 3.24: Phổ khối lượng của HAM4 71
Hình 3.25: Công thức phân tử HMBC của hợp chất 4 72
Hình 3.26: Phổ khối lượng của hợp chất HAM5 74
Hình 3.27: Phổ 1
H-NMR của hợp chất HAM5 75
Hình 3.28: Phổ 13
C-NMR của hợp chất HAM5 76
Hình 3.29: Phổ DEPT của hợp chất HAM5 76
Hình 3.30: Phổ HSQC của hợp chất HAM5 76
Hình 3.31: Phổ HMBC của hợp chất HAM5 77
Hình 3.32: Công thức phân tử HMBC của hợp chất HAM5 77
Hình 3.33: Phổ HR-ESI-MS của hợp chất HAM6 80
Hình 3.34: Phổ IR của hợp chất HAM6 80
Hình 3.35: Phổ 13
C-NMR của hợp chất HAM6 81
Hình 3.36: Phổ DEPT của hợp chất HAM6 81
Hình 3.37: Phổ 1
H-NMR của hợp chất HAM6 82
Hình 3.38: Phổ 1
H-NMR của hợp chất HAM6 82
Hình 3.39: Phổ HMBC của hợp chất HAM6 83













4



DANH SÁCH SƠ ĐỒ

Trang
Sơ đồ 2.1. Phân lập các hợp chất từ nấm tổ ong lông thô 34
Sơ đồ 2.2. Phân lập các hợp chất từ quả thể nấm linh chi 43
Sơ đồ 2.3. Phân lập các chất từ quả thể nấm linh chi đen bóng 49


1



DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT


GC-MS: Gas Chromatography-Mass Spectrometry (Sắc ký khí-khối phổ liên
hợp)
CC: Column Chromatography (Sắc kí cột)
FC: Flash Chromatography (Sắc ký cột nhanh)
TLC: Thin Layer Chromatography (Sắc kí lớp mỏng)
HPLC: High Performance Liquid Chromatography(Sắc ký lỏng cao áp)
IR: Infrared Spectroscopy (Phổ hồng ngoại)
MS: Mass Spectroscopy (Phổ khối lượng)
EI-MS: Electron Impact-Mass Spectroscopy (Phổ khối va chạm electron)
ESI-MS: Electron Spray Ionzation-Mass Spectroscopy (Phổ khối lượng phun mù
electron)
HR-ESI-MS: High Relution-Electron Spray Impact Mass Spectroscopy (Phổ
khối lượng phân giải cao phun mù electron)
1
H-NMR: Proton Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt
nhân proton)
13
C-NMR: Carbon Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt
nhân cacbon-13)
DEPT: Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer.
HSQC: Heteronuclear Single Quantum Correlation
HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation
NOESY: Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy
s: singlet
br s: singlet tù
t: triplet
d: dublet
dd: dublet của duplet
dt: dublet của triplet
2



m: multiplet
TMS: Tetramethylsilan
DMSO: DiMethylSulfoxide
Đ.n.c.: Điểm nóng chảy.
EC 50 : Giá trị 50% các tế bào hoặc gốc tự do bị chết hoặc được tạo ra bởi DPPH
được trung hòa
RT: retention time (Thời gian lưu)

1



MỞ ĐẦU

1. Lí do chọn đề tài
Nấm là sinh vật không thể thiếu trong đời sống, không có nấm, chu trình tuần hoàn
vật chất sẽ bị mất một mắt xích quan trọng trong việc phân hủy chất bã hữu cơ. Nấm là
nguồn thực phẩm giàu đạm, đầy đủ các axit amin thiết yếu, hàm lượng chất béo ít và đó
là những axit béo chưa bão hòa, giá trị năng lượng cao, giàu khoáng chất và các vitamin
có tác dụng tốt cho sức khỏe con người. Ngoài ra, trong nấm còn chứa nhiều hoạt chất
có tính sinh học, góp phần ngăn ngừa và điều trị bệnh cho con người.
Ngày nay các nhà khoa học đang nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh
học của các loài nấm và phát hiện một số hoạt chất có dược tính mạnh đối với các căn
bệnh nan y như viêm gan, ung thư, HIV Việc đưa vào sử dụng rộng rãi các chế phẩm
được tách chiết từ nấm sẽ giúp con người khỏe mạnh và phòng chống được nhiều căn
bệnh tiềm ẩn, nguy hiểm.
Trong khi đó, Việt Nam là một trong những quốc gia có đa dạng sinh học cao trên
thế giới với cấu trúc địa chất độc đáo, địa lý thủy văn đa dạng, khí hậu nhiệt đới gió
mùa, những kiểu sinh thái khác nhau đã góp phần tạo nên sự đa dạng của khu hệ nấm
Việt Nam. Đến năm 2010, có khoảng 2500 loài nấm đã được ghi nhận cho lãnh thổ Việt
Nam, trong số đó khoảng 1400 loài thuộc 120 chi là những loài nấm lớn [3, 4, 9].
Các loài nấm lớn của Việt Nam có giá trị tài nguyên rất đáng kể về nhiều mặt, có
khoảng 50 loài là nấm ăn quý như: các loài mộc nhĩ, ngân nhĩ, nấm hương (Lentinula
edodes), nấm rơm, nấm mối, nấm thông (Boletus edulis Bull.), Nấm chàm (Boletus aff.
felleus Bull.), Nấm bào ngư (Pleurotus spp.), Nấm mào gà (Cantherellus cibarius Fr.),
Nấm ngọc châm (Hypsizigus marmoreus), Nấm kim châm (Flammulina velutipes) .
[4, 6]. Có khoảng hơn 200 loài nấm dùng làm dược liệu, trong đó có rất nhiều loài là
dược liệu quý như: linh chi một năm (G.lucidum), linh chi sò (G.capense); cổ Linh chi
(G.applanatum), nấm vân chi (Trametes versicolor), nấm phiến chi (Schizophyllum
commune), nấm hương (Lentinula edode), nấm kim châm (Flammulina velutipes), mộc
nhĩ, ngân nhĩ, đông trùng hạ thảo (Cordycep sinensis, Cordycep militaris) [8].
Những nghiên cứu bước đầu về các hợp chất có hoạt tính sinh học của một số nấm lớn
Việt Nam cho thấy chúng rất giàu các hợp chất có trọng lượng phân tử lớn như
polysaccharit, polysaccharit-peptit, lectin, các chất có trọng lượng phân tử nhỏ như các
flavonoit, steroit, terpenoit có tác dụng chống viêm, tăng cường đáp ứng miễn dịch,
hỗ trợ điều trị các bệnh hiểm nghèo như ung thư, suy giảm miễn dịch, tiết niệu, tim 2



mạch Khoảng 50 loài nấm có khả năng sinh enzym và một số hoạt chất quý có thể
được ứng dụng trong công nghệ sinh học và bảo vệ môi trường.
Các loài nấm độc ở Việt Nam cũng khá phong phú, những nghiên cứu bước đầu đã
chỉ ra danh lục của hơn 30 loài. Trong số các loài nấm độc của Việt Nam, nhóm nguy
hiểm nhất là các loài gây ngộ độc chết người như: nấm độc xanh đen (Amanita
phalloides), nấm độc tán trắng (Amanita verna), nấm độc trắng hình nón (Amanita
virosa) . đã gây ra rất nhiều vụ ngộ độc, đặc biệt là ở các vùng núi nơi có nhiều đồng
bào các dân tộc thiểu số sinh sống. Một số loài nấm độc khác gây ngộ độc thần kinh,
tiêu hóa, gây ảo giác khác cũng rất nguy hiểm, như: nấm ruồi, nấm độc đỏ (Amanita
muscaria), nấm độc nâu (Amanita pantherina), nấm độc rỉ sắt, nấm phân [8].
Nghệ An là tỉnh có vườn Quốc gia Pù Mát, khu bảo tồn thiên nhiên Pù Huống và
khu bảo tồn thiên nhiên Pù Hoạt. Đây là những vùng được đánh giá là có tính đa dạng
sinh học rất cao, tại đây có chứa đựng nguồn lợi rất lớn về đa dạng sinh học, trong đó có
nguồn lợi lớn về nấm và có thể sử dụng chúng làm nguyên liệu tốt cho các ngành công
nghiệp thực phẩm, dược phẩm
Các nghiên cứu về nấm ở Việt Nam nói chung và Nghệ An nói riêng vẫn còn là
một vấn đề khá mới, chưa nhận được sự quan tâm đúng mức của các nhà khoa học. Do
vậy, việc nghiên cứu về nấm ở Nghệ An là một yêu cầu bức thiết, có ý nghĩa lý luận và
thực tiễn quan trọng, góp phần quan trọng trong việc tìm hiểu nguồn tài nguyên thiên
nhiên, về giá trị kinh tế và tầm quan trọng của nguồn dược liệu thiên nhiên của nước ta
nói chung và tỉnh Nghệ An nói riêng. Vì lý do đó chúng tôi đã chọn đề tài: “Phân lập
và xác định cấu trúc các hợp chất có hoạt tính sinh học từ nấm tổ ong lông thô
(Hexagonia apiaria (Pers.) Fries), loài nấm linh chi (Ganoderma pfeifferi Bres.) và
nấm linh chi đen bóng (Ganoderma mastoporum (Mont) Pat.) ở vùng Bắc Trung
Bộ”.
2. Đối tượng nghiên cứu
Đối tượng nghiên cứu của luận án là dịch chiết từ loài nấm tổ ong lông thô
(Hexagonia apiaria (Pers.) Fries), loài nấm linh chi (Ganoderma pfeifferi Bres.) và nấm
linh chi đen bóng (Ganoderma mastoporum (Mont) Pat.) ở vùng Bắc Trung Bộ.
3. Nhiệm vụ nghiên cứu
- Chiết chọn lọc với các dung môi thích hợp để thu được hỗn hợp các hợp chất từ
các loài nấm tổ ong lông thô (Hexagonia apiaria (Pers.) Fries), nấm linh chi
(Ganoderma pfeifferi Bres.) và nấm linh chi đen bóng (Ganoderma mastoporum (Mont) 3



Pat.).
- Phân lập và xác định cấu trúc một số hợp chất.
- Thử hoạt tính sinh học của một số hợp chất phân lập được.
4. Phương pháp nghiên cứu
- Phương pháp lấy mẫu: mẫu sau khi lấy về được rửa sạch, sấy khô ở 40 0 C. Việc
xử lý tiếp các mẫu bằng phương pháp chiết chọn lọc với các dung môi thích hợp để thu
được hỗn hợp các hợp chất dùng cho nghiên cứu được nêu ở phần thực nghiệm.
- Phương pháp phân tích, tách các hỗn hợp và phân lập các chất: đã sử dụng các
phương pháp sắc ký cột thường (CC), sắc ký lớp mỏng (TLC), sắc ký cột nhanh (FC)
với các pha tĩnh khác nhau như silica gel, sephadex LH-20, RP18, sắc ký lỏng hiệu năng
cao (HPLC) trên các pha đảo và pha silica gel.
- Phương pháp khảo sát cấu trúc các hợp chất: Cấu trúc hoá học các hợp chất
được phân lập được xác định bằng các phương pháp vật lý hiện đại như phổ tử ngoại
(UV), phổ hồng ngoại (IR), phổ khối lượng va chạm electron (EI-MS), phổ khối lượng
phun mù electron (ESI-MS), phổ khối lượng phân giải cao (HR-MS), phổ cộng hưởng
từ hạt nhân một chiều (1D NMR) và hai chiều (2D-NMR) với các kỹ thuật khác nhau
như 1
H-NMR,
13
C-NMR, DEPT,
1
H-
1 H COSY, HSQC và HMBC đã được sử dụng.
- Cấu trúc lập thể tương đối và tuyệt đối của các hợp chất này được xác định
bằng các phản ứng hoá học và các phương pháp phổ NMR với các kỹ thuật NOE,
NOESY .
- Thăm dò các hoạt tính sinh học gây độc tế bào ung thư, kháng viêm và hoạt
tính kháng khuẩn, kháng nấm.
5. Những đóng góp mới của luận án
Nghiên cứu thành phần hoá học và hoạt tính sinh học quả thể nấm nấm tổ ong lông
thô (Hexagonia apiaria (Pers.) Fries), quả thể nấm linh chi (Ganoderma pfeifferi Bres.)
và nấm linh chi đen bóng (Ganoderma mastoporum (Mont) Pat.) ở Việt Nam, chúng tôi
đã thu được một số kết quả như sau:
1. Từ dịch chiết quả thể nấm tổ ong lông thô (Hexagonia apiaria) đã phân lập và
xác định cấu trúc 9 hợp chất:
- 07 hợp chất triterpenoit: hexagonin A, hexagonin B, hexagonin C, hexagonin
D, hexagonin E; hexatenuin A; axit ursolic. Trong đó hexagonin A, hexagonin B,
hexagonin C, hexagonin D, hexagonin E là các hợp chất mới. 4



- 02 hợp chất sterol: ergosterol, ergosterol peroxit. Các hợp chất này lần đầu tiên
được phân lập từ loài nấm này.
- Sáu hợp chất hexagonin A, hexagonin B, hexagonin C, hexagonin D, hexagonin
E, hexatenuin A đều có khả năng kháng viêm.
2. Từ dịch chiết quả thể nấm linh chi (G. pfeifferi.) phân lập được 6 hợp chất:
- 03 hợp chất triterpenoit: axit 3β-hydroxy-5α-lanosta-7,9,24(E)-trien-26-oic;
ganodermadiol; axit 7-oxo-ganoderic Z;
- 03 hợp chất sterol: ergosterol, ergosterol peroxit, cerevisterol.
- Hợp chất ergosterol có khả năng ức chế sự tạo thành NO trong khoảng nồng độ
2,5-20 àg/mL, với IC 50 là 19,61 àg/mL.
3. Từ dịch chiết quả thể nấm linh chi đen bóng (G. mastoporum (Mont) Pat.)
phân lập được 8 hợp chất:
- 03 hợp chất triterpenoit: Δ 1
-lupenon, ganodermanondiol, lucidumol B;
- 05 hợp chất sterol: ergosta-7,22-dien-3β-ol; ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-on;
ergosterol peroxit; ergosta-7,22-dien-3-on; 3β,5-dihydroxy-(22E,24R)-ergosta-7,22-
dien-6-on;
- Các hợp chất Δ 1
–lupenon, ganodermanondiol, lucidumol B, ergosta-7,22-dien-
3b-ol, ergosta -4,6,8(14),22-tetraen-3-on, ergosterol peroxit, ergosta -7,22-dien-3-on;
3β,5-dihydroxy-(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-6-on có khả năng ức chế sự sản sinh các
anion superoxit trên bạch cầu trung tính của người theo cơ chế tác động liên quan đến
sự ức chế con đường dẫn truyền tín hiệu của p38 MAPK.
6. Cấu trúc của luận án
Luận án bao gồm 135 trang với 26 bảng số liệu, 39 hình và 3 sơ đồ với 150 tài
liệu tham khảo. Kết cấu của luận án gồm: mở đầu (4 trang), tổng quan (25 trang),
phương pháp và thực nghiệm (20 trang), kết quả và thảo luận (69 trang), kết luận (1
trang), danh mục công trình công bố (1 trang), tài liệu tham khảo (14 trang). Ngoài ra
còn có phần phụ lục gồm 60 phổ của một số hợp chất chọn lọc.