Luận Văn Nghiên cứu xây dựng hệ thống tái sinh in vitro qua đa chồi cây thông nhựa (Pinus merkusii) phục vụ c

Đề tài: Nghiên cứu xây dựng hệ thống tái sinh in vitro qua đa chồi cây thông nhựa (Pinus merkusii) phục vụ chuyển gen



MỤC LỤC​

Phần 1: MỞ ĐẦU 1

1.1. Đặt vấn đề. 1

1.2. Mục đích và yêu cầu. 2

1.2.1. Mục đích. 2

1.2.2. Yêu cầu. 2

Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Gíới thiệu về cây thông nhựa. 3

2.1.1. Đặc điểm sinh học và phân bố của cây thông nhựa. 3

2.1.2. Giá trị kinh tế và giá trị sử dụng của cây thông nhựa. 4

2.1.3. Tình hình sản xuất cây thông để khai thác nhựa trên thế giới và Việt Nam 5

2.2. Công nghệ sinh học trong cải tạo giống cây trồng. 7

2.2.1. Sự tái sinh cây in vitro. 7

2.2.2. Cải tiến cây trồng bằng phương pháp chuyển gen. 9

2.2.3. Phương pháp chuyển gen thông qua A. tumefaciens. 12

2.2.4. Chọn lọc, đánh giá tế bào và cây chuyển gen. 15

2.3. Một số kết quả nghiên cứu công nghệ sinh học về cây thông. 16

2.3.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới 16

2.3.2. Tình hình nghiên cứu trong nước. 19

Phần 3: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21

3.1. Đối tượng, vật liệu, địa điểm và thời gian nghiên cứu. 21

3.1.1. Đối tượng nghiên cứu. 21

3.1.2. Vật liệu nghiên cứu. 21

3.1.3. Địa điểm và thời gian nghiên cứu. 22

3.2 Nội dung nghiên cứu. 22

3.3. Phương pháp nghiên cứu. 22

3.3.1. Bố trí thí nghiệm 22



3.3.2. Tạo vật liệu nuôi cấy. 22

3.3.3. Tái sinh cây thông qua đa chồi 23

3.3.4. Ảnh hưởng của chất chọn lọc PPT đến sự sinh trưởng của phôi hạt và cây thông nhựa in vitro. 26

3.3.5. Thử nghiệm khả năng chuyển gen gus vào cây thông nhựa thông qua A. tumefaciens 27

3.3.6. Các chỉ tiêu theo dõi 28

3.3.7. Xử lý số liệu. 28

Phần 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29

4.1. Tái sinh cây in vitro bằng phương pháp tạo đa chồi 29

4.1.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của tổ hợp IBA và BAP đến khả năng tạo chồi từ đoạn thân 29

4.1.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của tổ hợp IBA và BAP đến khả năng tạo chồi từ chồi đỉnh ngọn 31

4.1.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của BAP, TDZ đến khả năng tạo chồi từ phôi hạt chín 32

4.1.4. Nghiên cứu hiệu quả tạo chồi từ phôi hạt chín bổ đôi của một số gia đình thông nhựa 34

4.1.5. Ảnh hưởng của NAA đến khả năng tạo rễ của chồi bất định. 37

4.1.6. Ảnh hưởng của IBA đến khả năng ra rễ của chồi bất định. 39

4.1.7. Ảnh hưởng của tổ hợp NAA và IBA đến khả năng ra rễ của chồi bất định 40

4.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ PPT đến khả năng sinh trưởng của phôi hạt và cây thông nhựa in vitro. 41

4.3. Thử nghiệm khả năng chuyển gen gus vào phôi hạt thông qua A. tumefaciens. 44

Phần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 47

5.1. Kết luận. 47

5.2. Đề nghị 48