Luận Văn Nghiên cứu quy trình tinh sạch fucoidan từ dịch chiết rong nâu Sargassum polycystum tỉnh Khánh Hòa

Đồ án tốt nghiệp năm 2012
Đề tài: Nghiên cứu quy trình tinh sạch fucoidan từ dịch chiết rong nâu Sargassum polycystum tỉnh Khánh Hòa


MỤC LỤC
Trang
LỜI CÁM ƠN . i
NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN ii
MỤC LỤC iii
DANH MỤC BẢNG v
DANH MỤC HÌNH vi
DANH MỤC CÁC CHỮVIẾT TẮT . vii
LỜI MỞĐẦU 1 .
CHƯƠNG I. TỔNG QUAN . 2
1.1. Tìm hiểu vềrong biển 2
1.1.1 Giới thiệu chung vềrong biển . 2
1.1.2 Hình thái-phân loại rong biển . 2
1.1.3 Tình hình sửdụng rong biển 6
1.1.4 Phân bốcủa 3 ngành rong biển trên thếgiới 7
1.1.5Sản lượng rong biển trên thếgiới 8
1.1.6. Công nghệchếbiến rong biển 12
1.1.6.1. Giới thiệu công nghệsau thu hoạch rong biển . 12
1.1.6.2. Vận chuyển . 14
1.1.6.3 Một sốhiện tượng hư hỏng của rong 14
1.1.6.4. Các biện pháp bảo quản rong khô 14
1.2. Tìm hiểu vềrong Nâu 15
1.2.1. Nguồn gốc, đặc điểm 15
4
1.2.2 Điều kiện sinh trưởng và phát triển 15
1.2.3. Thành phần hóa học của rong Nâu . 16
1.2.3.1 Sắc tố . 16
1.2.3.2. Carbohydrate 16
1.2.3.3. Protein 16
1.2.3.4. Chất khoáng 17
1.3. Fucoidan . 17
1.3.1 Giới thiệu chung vềfucoidan . 17
1.3.2 Đặc điểm, cấu trúc và các tính chất của fucoidan 19
1.3.3 Công dụng sinh học của fucoidan 21
1.3.3.1. Một sốtác dụng chữa bệnh của fucoidan . 21
1.3.3.2. Các nghiên cứu vềhoạt tính của fucoidan . 23
CHƯƠNG 2: ĐỐITƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33
2.1. Đối tượng nghiên cứu 33
2.2. Phương pháp nghiên cứu . 33
2.2.1. Phương pháp phân tích . 33
2.2.1.1. Phân tích fucoidan 33
2.2.1.2. Xác định tạp chất 36
2.2.2. Phương pháp tinh sạch . 36
2.2.3. Bốtrí thí nghiệm 38
2.2.3.1. Chọn quy trình thu dịch chiết rong 38
5
2.2.3.2. Bốtrí thí nghiệm . 41
a. Thí nghiệm 1 41
b.Thí nghiệm 2 42
c. Thí nghiệm 3 43
d. thí nghiệm 4 . 45
e. thí nghiệm 5 . 45
f. thí nghiệm 6 . 46
2.3. Dụng cụvà hóa chất 48
2.3.1. Dụng cụsửdụng 48
2.3.2. Hóa chất sửdụng 48
2.4. Phương pháp xửlý sốliệu . 48
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢNGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN . 49
3.1. Kết quảnghiên cứu từcác thí nghiệm . 49
3.2. Đềxuất quy trình tinh sạch fucoidan . 61
3.3. Đánh giá chếphẩm fucoidan tinh sạch 63
TÀI LIỆU THAM KHẢO 65
6
DANH MỤC BẢNG
Trang
Bảng 1.1. Thành phần hoá học (trên 100g rong) của một số
loài rong trong 3 ngành chính 4
Bảng 1.2. Các dạng hydratcacbon trong 3 ngành rong biển . 5
Bảng 1.3. Danh sách các loài rong nâu đã được nghiên cứu
cấu trúc fucoidan. 11
Bảng 3.1. Hàm lượng fucoidan(g) thu được khi chiết rút
bằng các dung dịch khác nhau và kết tủa bằng ethanol. 49
Bảng 3.2. Hàm lượng fucoidan (g) thu được khi chiết rút
bằng các dịch chiết khác nhau qua loại bỏalginate và
kết tủa bằng ethanol 52
Bảng 3.3. Hàm lượng fucoidan thu được khi chiết rút
bằng các dung dịch khác nhau, loại alginate, loại bỏcalcium
và kết tủa fucoidan bằng ethanol 54
Bảng 3.4. Hàm lượng fucoidan (g) thu được khi chiết rút
bằng các dung môi khác nhau và kết tủa bằng dung dịch BKC 10% . 56
Bảng 3.5. Lượng fucoidan (g) thu được khi chiết rút
bằng các dung môi khác nhau, pha loãng dịch và
kết tủa fucoidan bằng BKC 10% 58
Bảng 3.6. lượng fucoidan thu được khi chiết rút
fucoidan bằng các chếđộchiết khác nhau, loại bỏalginate,
7
loại calcium và tách fucoidan bằng BKC 59
Bảng 3.7. PhổHNMR của fucoidan giải hấp
bằng NaCl rắn trong ethanol . 64
Hình 3.8. PhổHNMR của fucoidan rửa giải trong
dung dịch NaCl bão hòa . 64
8
DANH MỤC CÁC HÌNH
Hình 1.1. Sơ đồcông nghệsau thu hoạch
rong biển của Việt Nam . 12
Hình 1.2. Sơ đồsơ chếrong biển lần hai 13
Hình 2.1. Phân tửalginic axít . 37
Hình 2.2. Cấu trúc laminaran . 37
Hình 2.3. Sơ đồchiết fucoidan theo bản quyềnUS6573250B2 49
Hình 2.4. Sơ đồchiết fucoidan theo bản quyền EP645143A1 40
Hình 3.1. Ảnh hưởng của dung môi chiết đến hàm lượng fucoidan
thu nhận bằng cách kết tủa fucoidan bằng ethanol. . 50
Bảng 3.2. Hàm lượng fucoidan (g) thu được khi chiết rút bằng
các dịch chiết khác nhau qua loại bỏalginate và kết tủa bằng ethanol 52
Hình 3.3. Ảnh hưởng của dung môi chiết đến lượng fucoidan thu nhận
sau khi loại aliginate, loại bỏcalcium và kết tủa fucoidan bằng ethanol . 54
Hình 3.4. Ảnh hưởng của dung môi chiết đến hàm lượng fucoidan
thu được bằng cách sửdụng nhựa BKC 10% đểkết tủa fucoidan . 60
Hình 3.5. Ảnh hưởng của dung môi chiết đến hàm lượng fucoidan
thu được bằng cách pha loãng và kết tủa fucoidan bằng BKC 10% . 58
Hình 3.6. Ảnh hưởng của dung môi chiết đến hàm lượng fucoidan
thu được bằng các chếđộchiết khác nhau, loại bỏalginate,
loại calcium và tách fucoidan bằng BKC . 60
Hình 3.7. Sơ đồquy trình tách chiết và tinh sạch fucoidan cho sản xuất 61
9
DANH MỤC CÁC CHỮVIẾT TẮT
CHỮVIẾT TẮT DIỄN GIẢI
AIDS Acquired immune deficiency syndrome.
C2 Vịtrí cacbon số2
Da
Dalton
DNA Acid Deoxyribo Nucleic
F. Fucus
FDA Food and Drug Administration
F-GX FUCOIDAN-GLYCALYX
fuc L-fucose
gal D-galactose
GC Gas chromatography
glc D-glucose
Gr Gram
HGF
Hepatocyte growth factor
HIV Human immunodeficiency virus
HPLC High Performance Liquid Chromatography
IT-IGF Insulin –Like Growth Factor I Treament
man D-mannose
MWCO Moleculare weight cut off
NK natural killer
PLC Performance Liquid Chromatography
rha D-rhamnose
S. Sargassum
F Fucoidan
KT Kết tủa
10
BKC benzalkonium chloride
WHO World Health Organization
xyl D-xylose
11
LỜI MỞĐẦU
Rong nâu là loại rong biển có giá trịdược liệu cao do trong thành phầ n
của nó có rất nhiều chất hoạt tính sinh học như fucoidan, laminaran,
phlorotannin, Trong đó, đặc biệt đáng chú ý là fucoidan. Ngày nay người ta
đã biết fucoidan có nhiềutính chất sinh học có giá trịđối với con người như:
Fucoidan không gây độc cho người, có hoạt tính chống đông cục máu, kháng
khuẩn, kháng virus (kểcảHIV), chống nghẽn tĩnh m ạch, chống ung thư,
chống viêm khớp, chống viêm nhiễm, giảm mỡmáu, hạcholesterol, ức chế
miễn dịch có thểsửdụng cho ghép phủtạng và phát hiện thấy fucoidan có
tiề m năng ứng dụng rất lớn trong phòng và chữa trịcác chứng bệnh nan y
cũng như trong các ngành công nghiệp thực phẩm và mỹphẩm.
Tuy nhiên trong quá trình thu nhận fucoidan từrong nâu chúng ta thường
thu được rất nhiều chất đi kèm như alginate, laminaran Do vậy, việc nghiên
cứu tinh sạch fucoidan là vấn đềđang được rất nhiều nhà nghiên cứu về
fucoidan đang quan tâm. Được sựđồng ý của Viện Nghiên cứu và Ứng dụng
Công nghệNha Trang -đơn vịđang nghiên cứu vềfucoidan và được sựđồng
ý của Khoa Công nghệThực phẩm, em thực hiện đềtài “Nghiên cứu quy
trình tinh sạch fucoidan từdịch chiết rong nâu Sargassum polycystum tỉnh
Khánh Hòa” với mục đích tìm kiếm phương pháptinh sạch fucoidan một
cách hiệu quả.
Nội dung của đồán:
1) Thửnghiệm tinh sạch fucoidan từdịch chiết rong nâu Sargassum
polycystum thu mẫu tại Khánh Hòa;
2) Đềxuất quy trình tinh sạch fucoidan từdịch chiết rong nâu
Sargassum polycystum thu mẫu tại Khánh Hòa;
3) Đánh giá fucoidan đã tinh sạch.
Do thời gian nghiên cứu có hạn nên đồ án này sẽ còn có những hạn chế,
em rất mong nhận được các ý kiến đóng góp của Qúy thầy cô và bạn bè đồng
nghiệp. Em xin chân thành cảm ơn.
12
CHƯƠNG I. TỔNG QUAN
1.1. TÌM HIỂU VỀ RONG BIỂN
1.1.1 Giới thiệu chung về rong biển.
Rong biển tên khoa học là marine-alage, marine plant hay seaweed.
Rong biển là thực vật thủy sinh có đời sống gắn liền với nước. Chúng có thể
đơn bào, đa bào sống thành quần thể, có kích thước hiển vi hoặc có thểdài
hàng chục mét. Hình dạng có thểlà hình cầu, hình sợi, hình phiến lá hay hình
thù rất đặc biệt.
Rong biển thường phân bố ởcác vùng nước mặn, nước lợ, cửa sông,
vùng triền sâu, vùng biển cạn .Chúng hấp thụmột lượng thức ăn phong phú
chảy trôi dạt từlụcđịa ra. Đời sống của rong biển phụthuộc vào các yếu tố:
địa bàn sinh trưởng, nhiệt độ, ánh sáng, độmuối, độpH, muối dinh dưỡng, khí
hòa tan, mức triều, sóng, gió, hải lưu.
Giá trịdinh dưỡng của rong biển là cung cấp đầy đủcác chất khoáng
đặc biệt là các nguyên tốvi lượng, các axit amin cần thiết cho cơ thể, các loại
vitamin (đặc biệt là thuộc nhóm A,B,C, E, ), các Carbohydrate đặc trưng
(mono-, olygo-và polysacaride) và các chất hoạt tính sinh học (lectin, sterol,
antibiotics, ) có lợi cho s ức khỏe và có khảnăng phòng bệnh tật (huyết áp,
nhuận tràng, béo phì, đông tụmáu, xơ vữa động mạch, ). Vì vậy ngày nay
rong biển được xếp vào loại thực phẩm chức năng (functional food) và ngày
càng được sửdụng rộng rãi trên khắp thếgiới. Các sản phẩm hữu cơ từrong
biển ngày nay được sửdụng hết sức rộng rãi trong các ngành công nghiệp
như: thực phẩm, dược phẩm, mỹphẩm, công nghệdệt, nông nghiệp, công
nghệsinh học, nghiên cứu khoa học, .
1.1.1 Hình thái -phân loại rong biển
Tùy thuộc vào thành phần cấu tạo, thành phần sắc tố, đặc điểm hình
thái, đặc điểm sinh sản mà rong biển được chia thành 9 ngành :
13
1. Ngành rong Lục (Chlorophyta)
2. Ngành rong Trần (Englenophyta)
3. Ngành rong Giáp (Pyrophyta)
4. Ngành rong Khuê (Bacillaareonphyta)
5. Ngành rong Kim (Chryrophyta)
6. Ngành rong Vàng (Xantophyta)
7. Ngành rong Nâu (Phaeophyta)
8. Ngành rong Đỏ (Rhodophyta)
9. Ngành rong Lam (Cyanophyta)
Trong đó, ba ngành có giá trịkinh tếcao là rong Lục, rong Nâu, rong Đỏ.
 Ngành rong Lục: có trên dưới 360 chi và hơn 5.700 loài, thành
phần sống trong nước ngọt, nét đặc trưng của loài rong này là có màu lục, sản
phẩm quang hợp là tinh bột. Rong có dạng tếbàođơn giản hoặc phức tạp,
nhiều tếbào hình phiến hay dạng sợi, chia nhánh hoặc không chia nhánh. Trừ
một sốtrường hợp rong chỉlà tếbào trần khôngcó vỏcòn lại đại đa sốcó vỏ
riêng như chất pectin hay Cellulose.
 Ngành rong Nâu: Có trên 190 chi, hơn 900 loài, phần lớn sống ở
biển, số chi, loài tìm thấy trong nước ngọt không nhiều lắm. Rong có cấu tạo
nhiều tế bào dạng màng giả, dạng phiến, dạng sợiđơn giản, một hàng tế bào
chia nhánh, dạng ống hoặc phân nhánh phức tạp hơn thành dạng cây có gốc,
rễ, lá, thân. Rong sinh trưởng ở đỉnh, ở giữa, ở gốc các lóng. Ngoài ra, do các
tế bào rong dạng phiến chia cắt sinh trưởng khuếch tán gọi là sinh trưởng bề
mặt.
 Ngành rong Đỏ: có 2.500 loài, gồm 400 chi, thuộc nhiều họ, phần
lớn sống ởbiển, có cấu tạo từnhiều tếbào, trừmột sốdạng từmột tếbào hay
quần thể. Rong có dạng hình trụdẹp dài, phiến chia hoặc không chia nhánh.
14
Sinh trưởng chủyếu ởđỉnh, ởgiữa đốt hay phân tán. Đặc trưng của loài này là
chứa nhiều sắc tốđỏ.
Bảng 1.1: Thành phần hoá học (trên 100 g rong) của một sốloài rong
trong 3 ngành chính [39].


TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Abdel -Fattah, A.F., Hussein, M.M.D., and Fouad, S.T.
(1978), “Carbohydrates of the brown seaweed Dictyota dichotoma”,
Phytochemistry17 741-743.
2. Aisa Y et al (2005) Fucoidan induces apoptosis of human HS-sultan
cells accompanied by activation of caspase-3 and down-regulationc o f ERK
pathways. Am J Hematol 78:7–14.
3. Angulo Y, Lomonte B (2003) Inhibitory effect of fucoidan on the
activities of crotaline snake venom myotoxic phospholipases A2.Biochem
Pharmacol 66:1993–2000.
4. Anno, K., Terahata, H., Hayashi, Y., and Seno, N. (1966), “Isolation
and purification of fucoidin from brown seaweed Pelvetia wrightii”, Agr.
Biol. Chem., 30 (5) 495-499.
5. Bo Li, Fei Lu, Xinjun Wei and Ruixiang Zhao, Fucoidan: Structure
and Bioactivity, Molecules 2008, 13, 1671-1695.
6. Catherine Boisson-Vidal, Frederic Chaubet, Lionel Chevolot, Corinne
Sinquin, Jocelyne Theveniaux, Jean Millet, Claude Sternberg, Barbara
Mulloy, and Anne Marie Fischer, Relationship Between Antithrombotic
Activities of Fucans and Their Structure, BOISSON-VIDAL ET AL. © 2001
Wiley-Liss, Inc. DRUG DEVELOPMENT RESEARCH 51:216–224 (2000).
7. Chizhov, A.O., Dell, A., Morris, H.R., Haslam, S.M., McDowell,
R.A., Shashkov, A.S., Nifant'ev, N.E., Khatuntseva, E.A., and Usov, A.I.
(1999), “A study of fucoidan from the brown seaweed Chorda filum”,
Carbohyd. Res., 320 (1-2) 108-119.
8. Church FC, Meade JB, Treanor RE, Whinna HC (1989) Antithrombin
activity of fucoidan. The interaction of fucoidan with heparin cofactor II,
antithrombin III, and thrombin. J Biol Chem 264:3618–3623.
76
9. Colliec, S., Boisson-Vidal, C., and Jozefonvicz, J. (1994), “A low
molecular weight fucoidan fraction from the brown seaweed Pelvetia
caniculata”, Phytochemistry, 35 (3) 697-700.
10. Coombe, D.R., Parish, C.R., Ramshaw, J.A. and Snowden, J.M.
1987. Analysis of the inhibition of tumour metastasis by sulphated
polysaccharides, Int. J. Cancer, 39: 82.
11. Duarte, M.E.R., Cardoso, M.A., Noseda, M.D., and Cerezo, A.S.
(2001), “Structural studies on fucoidans from the brown seaweed Sargassum
stenophyllum:, Carbohyd. Res., 333 (4) 281-293.
12. Durig, J., Bruhn, T., Zurborn, K.H., Gutensohn, K., Bruhn, H.D., and
Beress, L. (1997), “Anticoagulant fucoidan fractions from Fucus vesiculosus
induce platelet activation in vitro”, Thromb. Res., 85 (6) 479-491.
13. E.G.V. Percival and A.G. Ross , J.Chem. Soc. Pg.717. (1950).
14. Hao, Shouzhu (Beijing, CN), METHODS OF TREATMENT OF
CARDIOVASCULAR AND CEREBROVASCULAR DISEASES WITH
FUCOIDAN , US200901708.
15. Haroun-Bouhedja, F., Ellouali, M., Sinquin, C. and Boisson-Vidal,
C. 2000. Relationship between sulfate groups and biological activities of
fucans, Thromb. Res., 100: 453-459.
16. Honya, M., Mori, M., Anzai, M., Araki, Y., and Nisizawa, K. (1999),
“Monthly changes in the content of fucans, their constituent sugars and
sulphate in cultured Laminaria japonica”, Hydrobiologia, 398/399 411-416.
17. Hoshino, T., Hayashi, T., Hayashi, K., Hamada, J., Lee, J.B., and
Sankawa, U. (1998), “An antivirally active sulfated polysaccharide from
Sargassum horneri(TURNER) C. AGARDH”, Biol. Pharm. Bull., 21 (7)
730-734.
18. http://www.fda.gov/Safety/MedWatch/SafetyInformation/SafetyAler
tsforHumanMedicalProducts/ucm166896.htm .
77
19. http://ars.els-cdn.com/content/image/1-s2.0S0043135403002938-gr4.gif
20. Investment Promotion Agency of Administrative Committee of
Yantai Economic & Technological Development Area, August 3, 2007,
http://www.yantaiinvest.gov.cn/htm_eng/project_auto_1.htm.
21. Itoh, Hiroko; Noda, Hiroyuki; Amano, Hideomi; Zhuaug, Cun;
Mizuno, Takashi; Ito, Hitosh (1993), “Antitumor activity and immunological
properties of marine algal polysaccharides, especially fucoidan, prepared from
Sargassum thunbergiiof Phaeophyceae”, I. Anticancer Res.13 (6A) 2045-52.
22. Catherine Boisson-Vidal, Frederic Chaubet, Lionel Chevolot,
Corinne Sinquin, Jocelyne Theveniaux, Jean Millet, Claude Sternberg,
Barbara Mulloy, and Anne Marie Fischer, Relationship Between
Antithrombotic Activities of Fucans and Their Structure, BOISSON-VIDAL
ET AL. © 2001 Wiley-Liss, Inc. DRUG DEVELOPMENT RESEARCH
51:216–224 (2000).
23. Jean-François Deux, Anne Meddahi-Pellé, Alain F. Le Blanche,
Laurent J. Feldman, Sylvia Colliec-Jouault, Françoise Brée, Frank
Boudghène, Jean-Baptiste Michel and Didier Letourneur, Low Molecular
Weight Fucoidan Prevents Neointimal Hyperplasia in Rabbit Iliac Artery In-Stent Restenosis Model, Arterioscler Thromb Vasc Biol 2002;22;1604-1609.
24. Jing Wang, Quanbin Zhang, Zhongshan Zhang, Houfang Song,
Pengcheng Li, Potential antioxidant and anticoagulant capacity of low
molecular weight fucoidan fractions extracted from Laminaria japonica
International Journal of Biological Macromolecules, Volume 46, Issue 1, 1
January 2010, Pages 6-12.
25. Kaori Haneji, Takehiro Matsuda, Mariko Tomita, Hirochika
Kawakami, Kazuiku Ohshiro, Jun-Nosuke Uchihara, Masato Masuda,
Nobuyuki Takasu, Yuetsu Tanaka, Takao Ohta, and Naoki Mori, Fucoidan
Extracted From Cladosiphon Okamuranus Tokida Induces Apoptosis of
78
Human T-Cell Leukemia Virus Type 1-Infected T-Cell Lines and Primary
Adult T-Cell Leukemia Cells, NUTRITION AND CANCER, 52(2), 189–201.
26. Kim KJ, Lee OH, Lee HH, Lee BY, A 4-week repeated oral dose
toxicity study of fucoidan from the Sporophyll of Undaria pinnatifida in
Sprague-Dawley rats, PMID: 19903507.
27. KOU HAYAKAWA1 and TAKEAKI NAGAMINE2, Effect of
Fucoidan on the Biotinidase Kinetics in Human Hepatocellular Carcinoma,
ANTICANCER RESEARCH 29: 1211-1218 (2009).
28. Koyanagi S, Tanigawa N, Nakagawa H, Soeda S, Shimeno H.,
Oversulfation of fucoidan enhances its anti-angiogenic and antitumor
activities, Biochem Pharmacol. 2003 Jan 15;65(2):173-9.
29. Lapshina LA, Reunov AV, Nagorskaya VP, Zvyagintseva TN,
Shevchenko NM (2006) Inhibitory effect of fucoidan from brown alga Fucus
evanescens on the spread of infection induced by tobacco mosaic virus in
tobacco leaves of two cultivars. Russ J Plant Physiol 53:246 –251.
30. Lee J-B, Hayashi K, Maeda M, Hayashi T (2004b) Antiherpetic
activities of sulfated polysaccharides from green algae. Planta Med 70:813–
817.
31. Leite,E.L.,Medeiros,M.G.L.,Rocha,H.A.O.,Farias,G.G.M.,daSilva,L.
F., Chavante, S.F., de Abreu, L.D., Dietrich, C.P., and Nader, H.B. (1998),
“Structure and pharmacological activities of a sulfatedxylofucoglucuronan
from the alga Spatoglossum schroederi”, Plant Sci., 132 215-228.
32. M. Tako , E. Yoza , S. Tohma , Chemical characterization of acetyl
fucoidan and alginate from commercially cultured Cladosiphon okamuranus.
Bot. Mar, 43, 393-398, (2000).
33. Maria E.R. Duarte,a Marc A. Cardoso,a Miguel D. Noseda,a,1
Alberto S. Cerezo (2001), “Structural studies on fucoidans from the brown
seaweed Sargassum stenophyllum”, Carbohydrate Research,333 (4) 281–
293.
79
34. Maria I. Bilan, Alexey A. Grachev, Alexander S. Shashkov, Nikolay
E, Nifantiev and Anatolii I. Usov (2004), “A highlyregular fraction of a
fucoidan from the brown seaweed Fucus distichus L”, Carbohydrate
Research339 (3) 511-517.
35. Marie-France Marais and Jean-Paul Joseleau (2001), “A fucoidan
fraction from Ascophyllum nodosum”, Carbohydrate Research, 336 (2) 155-159.
36. Maruyama, H., Nakajima, J., and Yamamoto, I. (1987), “A study on
the anticoagulant and fibrinolytic activities of a crude fucoidan from the
edible brown seaweed Laminaria religiosa, with special reference to its
inhibitory effect on the growth of sarcoma-180 ascites cells subcutaneously
implanted into mice”, Kitasato Arch. Exp. Med., 60 (3) 105-121.
37. Mian, A.J. and Percival, E. (1973), “Carbohydrates of the brown
seaweeds Himanthalia lorea, Bifurcaria bifurcata, and Padina pavonia”.
Carbohyd. Res., 26 (1) 133-146.
38. Mori, H., Kamei, H., Nishide, E., and Nisizawa, K. (1982), “Sugar
constituents of some sulfated polysaccharides from the sporophylls of
wakame (Undaria pinnatifida) and their biological activities”, In “Marine
algae in pharmaceutical science”, Walterde Gruyter, Berlin and New York,
109-121.
39. Nagaoka, M., Shibata, H., Kimura-Takagi, I., Hashimoto, S.,
Kimura, K., Makino, T., Aiyama, R., Ueyama, S., and Yokokura, T. (1999),
“Structural study of fucoidan from Cladosiphon okamuranus Tokida”.
Glycoconj. J., 16 (1) 19-26.
40. Nguyễn Duy Nhứt, Bùi Minh Lý, Nguyễn Mạnh Cường, Trần Văn
Sung, Nghiên cứu cấu trúc của fucoidan có hoạt tính gây độc tếbào tách từ
rong nâu sargassum swartzii bằng phương pháp phổkhối nhiều lần, 2009, Tạp
chí hoá học số3, tập 47 trang 300-307.
41. Nguyễn Duy Nhứt, Luận án tiến sĩ, 2008.
80
42. Phân lập và sàng lọc vi sinh vật biển phân cắt fucoidan từrong nâu,
2009, Hội nghịkhoa học toàn quốc vềsinh học biển và phát triển bền vững.
640-644.
43. Raoui M. Maaroufi, Paola Giordano, Patrick Triadou , Jacqueline
Tapon-Bretaudière, Marie-Dominique Dautzenberg , Anne-Marie Fischer,
Effect of oversulfated dermatan sulfate derivatives on platelet aggregation,
Thrombosis Research (2007) 120, 615–621.
44. Re´ gis Daniel, Olivier Berteau, Lionel Chevolot, Anne Varenne, P.
Gareil and Nicole Goasdoue (2001), “Regioselective desulfation of sulfated
L-fucopyranoside by a new sulfoesterase from the marine mollusk Pecten
maximus Application to the structural study of algal fucoidan (Ascophyllum
nodosum)”, Eur. J. Biochem,268 (21) 5617–562.
45. Rita Elkins M.H.,.(2001), “Limu Moui –prize sea plant of tonga and
the south pacific”, Woodland Publishing -Utah –USA 32 pagine
46. S. Soeda, Y. Ohmagari, H. Shimeno and A.Nagamatsu, preparation
of oversulfated fucoidan fragments and evaluation of their antithrombotic
actmties, thrombosis research 72; 247-256,1993.
47. Sandström E., Öberg b., (1993), “Antiviral Therapy for Human
Immunodeficiency Virus Infections”, DRUGS ISSN 0012-6667
CODEN DRUGAY, 45 (5) 637-653.
48. Shouzhu HAO tổng kết trong patent US20090170810A1 "Methods
of treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases with low
molecular weight " vào tháng 6 năm 2009.
49. Siddhanta AK, Murthy ASK (2001) Bioactive polysaccharides from
marine brown algae (Phaeophyceae). J Indian ChemSoc 78:431–437.
50. Silva TMA (2005) Partial characterization and anticoagulant activity
of a heterofucan from the brown seaweed Padina gymnospora. Braz J Med
Biol Res 38:523–533 Revista brasileira de pesquisas medicas e
biologicas/Sociedade Brasileira de Biofisica . [et al.].