Thạc Sĩ Nghiên cứu khả năng đáp ứng phát sinh hình thái của lát mỏng tế bào phát hoa đồng tiền ( Gerbera Jam

LỜI MỞ ĐẦU
1.1. Đặt vấn đề
Hoa Đồng tiền (Gerbera jamesonii) là cây cảnh thuộc họ cúc (Asteraceae).
Cây rất phổ biến được dùng làm cây trang trí trong sân vườn hay dùng làm cây cắt
cành. Nên có tầm quan trọng về mặt thương mại, hoa Đồng tiền đứng hàng thứ năm
trong số các loại hoa được cắt để bán trên thế giới (chỉ sau hoa hồng, cẩm chướng,
cúc đại đóa và tulip). Ngoài ra cây còn chứa các dẫn xuất của comarin nguồn gốc tự
nhiên – có tính chất chống đông máu.

Nhân giống in vitro là một công cụ kỹ thuật quan trọng nhằm tạo một số
lượng cây lớn mà vẫn giữ được đặc tính di truyền như cây mẹ. Trên thế giới cũng
như Việt Nam đã có nhiều công trình nghiên cứu về cây hoa Đồng tiền trong lĩnh
vực nuôi cấy in vitro, và đã thiết kế được nhiều quy trình nhân giống số lượng lớn và
đồng nhất từ mẫu ban đầu là chồi đỉnh, cuống lá, mặt lá, rễ, đế hoa, và cánh hoa. Đề
tài “Nghiên cứu khả năng đáp ứng phát sinh hình thái của lát mỏng tế bào phát
hoa Đồng tiền (Gerbera jamesonii) trong điều kiện in vtro” nhằm bổ sung thêm
nguồn mẫu ban đầu để Xây dựng một quy trình nhân giống mới từ tế bào phát hoa.
Trong nghiên cứu này, mẫu cấy sử dụng là các lát mỏng tTCL được cắt từ phát hoa
cây Đồng tiền.
Các kết quả cho thấy được kỹ thuật nuôi cấy lát mỏng tế bào phát hoa tương
lai có thể dùng để nhân giống cây hoa Đồng tiền cùng với các kỹ thuật khác đã
nghiên cứu thành công
1.2. Mục đích, nội dung nghiên cứu
1.2.1. Mục đích
Bước đầu thực hiện nghiên cứu khả năng đáp ứng phát sinh hình thái của lát
mỏng tế bào phát hoa Đồng tiền (Gerbera jamesonii) trong điều kiện in vitro .
1.2.2. Nội dung
Nghiên cứu khử trùng mẫu cấy để xác định nồng độ hóa chất, thời gian khử
trùng tối ưu.
Nghiên cứu các nồng độ của chất điều hòa sinh trưởng ảnh hưởng lên mẫu


MỤC LỤC

Lời cảm ơn
Mục lục
Danh mục chữ viết tắt i
Danh mục bảng ii
Danh mục hình . .iii

Phần 1: MỞ ĐẦU

1.1.
1.2.

Đặt vấn đề .1
Mục đích, nội dung nghiên cứu 1


1.2.1. Mục đích 1
1.2.2 Nội dung 1

Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1. Khái quát về kỹ thuật vi nhân giống . .2
2.1.1. Khái niệm .2
2.1.2. Ứng dụng của kỹ thuật nuôi cấy mô .2
2.1.3. Các bước nhân giống in vitro . .2
2.1.4. Quá trình tái sinh cơ quan trong vi nhân giống in vitro .6
2.1.4.1. Sự hình thành chồi bất định 7
2.1.4.2. Sự hình thành rễ bất định . .9
2.1.5. Các yếu tố ảnh hưởng đến sự phát sinh hình thái in vitro 11
2.1.5.1. Ảnh hưởng của mẫu cấy . 11
2.1.5.2. Ảnh hưởng của chất điều hòa sinh trưởng và Phát triển của thực vật 14
2.1.6. Các chất khử trùng Hóa học được dùng trong nuôi cấy mô 15
2.2. Kỹ thuật nuôi cấy lớp mỏng tế bào 17
2.2.1. Giới thiệu . 17
2.2.2. Định nghĩa hệ thống lớp mỏng tế bào . 17
2.2.3. Một số nghiên cứu ứng dụng phương pháp nuôi cấy lớp mỏng tế bào . 19

2.3. Giới thiệu chung về cây hoa Đồng tiền 21
2.3.1. Các đặc điểm quan trọng của cây hoa Đồng tiền 22
2.3.1.1. Vị trí phân loại . 22
2.3.1.2. Đặc điểm hình thái . 22
2.3.1.3. Điều kiện trồng trọt 23
2.3.2. Một số phương pháp vi nhân giống đối với cây hoa Đồng tiền . 25

Phần 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
3.1. Vật liệu . 30
3.1.1. Đối tượng nghiên cứu 30
3.1.2. Mẫu cấy . 30
3.1.3. Các loại môi trường . 30
3.1.4. Điều kiện nuôi cấy . 30
3.2. Phương pháp thí nghiệm . 31
3.2.1. Khử trùng mẫu 31
3.2.2. Bố trí thí nghiệm . 32
3.2.2.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát thời gian khử trùng mẫu cấy bằng dung dịch Javel .
3.2.2.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng của BA lên sự phát sinh hình thái của
mẫu cấy tTCL phát hoa Đồng tiền 32
3.2.2.3. Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng của NAA lên sự phát sinh hình thái của
mẫu cấy tTCL phát hoa Đồng tiền 33
3.2.2.4. Thí nghiệm 4: : Khảo sát ảnh hưởng của BA kết hợp với NAA lên khả năng
tái sinh chồi 34
3.2.3. Phân tích thống kê . 34



Phần 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát thời gian khử trùng mẫu cấy bằng dung dịch Javel
4.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng của BA lên sự phát sinh hình thái của
mẫu cấy tTCL phát hoa Đồng tiền . 38
4.3. Thí nghiệm 3: Môi trường khảo sát ảnh hưởng của NAA lên sự phát sinh
hình thái của mẫu cấy tTCL phát hoa Đồng tiền 41
4.4. Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng của BA kết hợp với NAA lên khả năng
tái sinh chồi 44

Phần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
5.1. Kết luận . 48
5.2. Đề Nghị 48


Phần 6 : TÀI LIỆU THAM KHẢO
6.1. Tài liệu tham khảo trong nước . a
6.2. Tài liệu tham khảo nước ngoài .a