Thạc Sĩ Nghiên cứu khả năng chống ung thư của các hoạt chất phân lập từ cây vông nem (Erythrina orientalis (

MỞ ĐẦU
Ung thư là nguyên nhân gây chế hàng đầu ở các nước có nền kinh tế phá triển à hứ hai ở các nước đang phát triển. Gánh nặng ung hư ở các nước đang phát triển tăng lên do hậu quả của sự tăng dân số già hó dân số cũng như sự du nhập lối sống có i m năng gây ung hư như hú huốc á í ận động à hực ph m “Tây hó ”. Theo T chức Y tế thế giới – WHO có ho ng 12.7 triệu c ung hư à7,6 triệu ca tử ong o ung hư được ghi nhận rong năm 2008 rong đó 56% số ca à 64% rường hợp tử ong à ở các nước đ ng phá riển. Cũng heo dự báo củaWHO, tới năm 2020, số người mắc ung hư rên oàn cầu có hể ăng ên đến 15triệu ca mới mỗi năm. Tỷ lệ chế o ung hư có hể chiếm 25% t ng số ca tử vong.Theo số liệu c ng bố tại Hội th o Quốc gi ph ng chống ung hư năm 2010 ViệtN m có 126.300 c mắc mới. Căn bệnh n n y này đ ng ăng nh nh so ới 10 năm rước [1]. Vốn à mộ đấ nước được hiên nhiên ưu đãi nằm rong ùng nhiệ đới gió mù Việ N m có một th m thực vậ cùng phong phú à đ ạng với hơn 12.000 oài hực vật bậc c o hác nh u. Từ nhi u thế kỷ nay, thực vậ h ng chỉ à nguồn cung cấp inh ưỡng cho con người mà c n à những phương huốc chữa bệnh hết sức uý giá b o gồm thuốc chống ung hư nói riêng à các bệnh hác nói chung.Bởi vậy, nghiên cứu m r các hợp chất từ nguồn ược liệu hiên nhiên có h năngchữ ung hư à mộ hướng nghiên cứu được nhi u nhà hoa học à hầy thuốc đầu ư ập rung nghiên cứu trong nhi u năm n y.Trong u hướng này chúng i iến hành nghiên cứu hoạ ính háng u của ba chất Hono io M gno o được ách chiết từ cây Hậu phác Magnolia officinalis Rehd. Et wils, Magnoliaceae à Derrone được ách chiết từ cây V ng nem Erythrina orientalis L. Murr., Fabaceae do Viện Dược liệu Trung ương cung cấp cho nhóm Nghiên cứu Ung hư hực nghiệm, Khoa Sinh học Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên Đại học Quốc gi Hà Nội nhằm mục đích: Kh o sá nh hưởng của ba chất Honokiol, M gno o à Derrone ên sự tăng rưởng của một số ng ế bào ung hư nu i cấy đơn ớp 2D.
Nghiên cứu nh hưởng củ Hono io ên m h nh 3D hối cầu đ bào các tế bào ung hư.
Bước đầu nghiên cứu cơ chế ác động của Hono io ên hệ thống vi sợi à ác động của ba chấ ên hoạ động của enzyme Aurora kinaza ở tế bào ung hư.

MỤC LỤC
DANH MỤC BẢNG viii
DANH MỤC HÌNH MINH HỌA ix
BẢNG DANH MỤC VIẾT TẮT .xiii
MỞ ĐẦU . 1
CHƯƠNG 1 – TỔNG QUAN . 3
1.1. T ng u n ung hư 3
1.1.1. Một số đặc điểm củ ung hư .3
1.1.2. Các gi i đoạn phá riển củ ung hư 5
1.2. Các m h nh sàng ọc huốc chống ung hư 8
1.2.1. Nu i cấy cơ u n 8
1.2.2. Nu i cấy tế bào .8
1.2.3. Nu i cấy khối cầu đ bào ung hư (mu ice u r umor
spheroid) 10
1.2.4. M h nh in i o 12
1.3. Mộ số ng ế bào ung hư .14
1.3.1. D ng ế bào ung hư biểu m ruột kết ở người - HCT116 .14
1.3.2. D ng ế bào ung hư biểu m c tử cung ở người - Hela .14
1.3.3. D ng ế bào ung hư biểu m ú ở người - MCF7 15
1.3.4. D ng ế bào ung hư ú ở người - KPL4 .16
1.4. Chế ph m Hono io M gno o Derrone à huốc T o .16
1.4.1. Hono io (H) à M gno o (M) 16
1.4.2. Derrone (D) 19
1.4.3. Taxol (Paclitaxel) .20
1.5. Enzyme Aurora kinaza 22
CHƯƠNG 2 – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25
2.1. Đối ượng nghiên cứu 25
2.2. Máy móc ụng cụ .25
2.3. Hó chất sử dụng .26
2.4. Phương pháp hoạ hó à nhân nu i các ng ế bào in vitro .27
2.5. Phương pháp hử độc ính MTS 28
2.6. Phương pháp hử độc ính rên m h nh spheroi .30
2.7. Phương pháp nhuộm miễn dịch huỳnh quang .31
CHƯƠNG 3 – KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33
3.1. Kế u h o sá độc ính củ Hono io M gno o à Derrone rên m
h nh 2D 33
3.1.1. Với ng HCT116 33
3.1.2. Với ng He 38
3.1.3. Với ng MCF7 .41
3.1.4. Với ng KPL4 44
3.2. Kế u nghiên cứu ác động củ Hono io rên m h nh 3D hối cầu đ
bào MCF7 51
3.2.1. Kết qu hí nghiệm heo õi sự ăng rưởng khối spheroid
MCF7 . .51
3.2.2. Kết qu hí nghiệm kiểm r ác động củ Hono io ên uá
r nh ạo khối spheroid MCF7 .54
3.2.3. Kết qu hí nghiệm kiểm r ác động củ Hono io ên sự
ăng rưởng của khối spheroid MCF7 .56
3.3. Kết qu nghiên cứu nh hưởng củ Hono io ên hệ vi sợi actin .59
3.4. Kết qu nghiên cứu nh hưởng củ Derrone ên sự phosphory hó
Histon H3 tại vị rí Serine 10 62
KẾT LUẬN . 66
KIẾN NGHỊ 67
TÀI LIỆU THAM KHẢO . 68