Luận Văn Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nuôi cấy meristem cây hành lá Allium wakegi

Đề tài: Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nuôi cấy meristem cây hành lá Allium wakegi



MỤC LỤC​

Lời cảm ơn. i

Mục lục. ii

Danh mục chữ viết tắt iv

Danh mục bảng. v

Danh mục biểu đồ. vi

Danh mục hình. vii

Tóm tắt viii

Phần I MỞ ĐẦU 1

1.1. Đặt vấn đề. 1

1.2. Mục đích, yêu cầu. 2

1.2.1. Mục đích. 2

1.2.2. Yêu cầu. 2

Phần II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Giới thiệu chung về cây hành lá (Allium wakegi). 3

2.1.2. Nguồn gốc và phân loại 3

2.1.2. Đặc điểm thực vật học. 4

2.1.3. Giá trị của hành tỏi 5

2.1.4. Tình hình sản xuất hành tỏi ở Việt Nam 6

2.2. Bệnh virus trên cây họ hành tỏi 7

2.2.1. Các loài virus gây bệnh trên cây họ hành tỏi 7

2.2.2. Tác hại của virus gây ra trên cây họ hành tỏi 10

2.3. Kỹ thuật làm sạch virus bằng nuôi cấy đỉnh sinh trưởng (meristem). 12

2.3.1. Cơ sở và nguyên lý. 12

2.3.2. Các kỹ thuật làm sạch virus trong nuôi cấy in vitro. 14

2.3.3. Phương pháp làm sạch virus bằng nuôi cấy meristem 18

Phần III VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25

3.1. Đối tượng nghiên cứu. 25

3.2. Vật liệu thí nghiệm 25

3.3. Địa điểm nghiên cứu. 25

3.4. Nội dung nghiên cứu. 25

3.5. Phương pháp nghiên cứu. 27

3.5.1. Phương pháp tách meristem 27

3.5.2. Phương pháp nuôi cấy mô invitro. 28

3.5.3. Phương pháp đánh giá độ sạch virus thông qua kỹ thuật RT-PCR (Reverse Transcriptase-polymerase chain reaction). 28

3.5.4. Phương pháp bố trí thí nghiệm 29

3.5.5. Phương pháp theo dõi 30

3.5.6. Phương pháp xử lý số liệu. 31

Phần IV KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32

4.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của tổ hợp chất điều tiết sinh trưởng tới sự tái sinh và phát sinh hình thái của meristem. 32

4.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của kích thước meristem đến khả năng tái sinh chồi. 37

4.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của xử lý hóa chất tới khả năng tái sinh của meristem. 40

4.4. Nghiên cứu khả năng nhân nhanh cây tái sinh từ meristem 41

4.4.1. Ảnh hưởng của nền môi trường tới sự nhân nhanh chồi tái sinh. 41

4.4.2. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và kinetin đến sự nhân nhanh chồi 46

4.5. Nghiên cứu ảnh hưởng của tổ hợp than hoạt tính và chất điều tiết sinh trưởng tới sự ra rễ của cây tái sinh. 50

4.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ đường tới sự tạo củ của cây tái sinh. 53

4.7. Đánh giá độ sạch bệnh virus trên cây hành tái sinh từ đỉnh sinh trưởng bằng phương pháp chuẩn đoán phân tử RT-PCR 58

Phần V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 60

5.1 Kết luận. 60

5.2. Đề nghị 62

TÀI LIỆU THAM KHẢO 63

PHỤ LỤC 65