Luận Văn Nghiên cứu đặc trưng protein của virus gây hội chứng đỏ đuôi ở tôm sú và tôm thẻ chân trắng

PHẦN 1. MỞ ĐẦU . 1

PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1 Tình hình nuôi tôm trên thế giới . 3
2.1.1 Hiện trạng chung . 3
2.1.2 Thiệt hại do TSV trên thế giới 4
2.2 Tình hình nuôi tôm tại Việt Nam . 4
2.2.1 Hiện trạng chung . 4
2.2.2 Thiệt hại do TSV tại Việt Nam . 5
2.3 Giới thiệu hội chứng Taura – TS (Taura syndrome) 6
2.3.1 Lịch sử và phân bố hội chứng Taura 6
2.3.2 Phân loại và tên gọi 7
2.3.2.1 Tên gọi 7
2.3.2.2 Vị trí phân loại 7
2.3.3 Đặc điểm cấu trúc và genom của TSV 7
2.3.4 Biểu hiện bệnh hội chứng Taura ở tôm . 8
2.3.5 Vật chủ 9
2.3.6 Sự đa dạng di truyền và sự xuất hiện các chủng TSV mới . 10
2.3.6.1 Sự đa dạng di truyền của TSV . 10
2.3.6.2 Sự xuất hiện các chủng TSV mới 10
2.3.7 Khả năng lây truyền của virus Taura 12
2.3.8 Một số đặc tính của virus Taura với các yếu tố lý hóa 12
2.4 Các phương pháp và kỹ thuật chuẩn đoán virus Taura 13
2.4.1 Chuẩn đoán dựa vào triệu chứng lâm sàng . 13
2.4.2 Phương pháp mô học . 14
2.4.3 Phương pháp cảm nhiễm sinh học 14
2.4.4 Phương pháp miễn dịch . 14
2.4.5 Phương pháp chuẩn đoán bằng mẫu dò gen (gene probe) 14
2.4.6 Phương pháp RT-PCR . 15

PHẦN 3. VẬT LIỆU VÀ PHưƠNG PHÁP . 16

3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu . 16
3.2 Hoá chất, thiết bị, dụng cụ và vật liệu . 16
3.2.1 Hóa chất . 16
3.2.1.1 Các hoá chất để thực hiện sắc ký lọc gel 16
3.2.1.2 Các dung dịch gốc để thực hiện SDS-PAGE 16
3.2.1.3 Các dung dịch gốc để nhuộm gel 16
3.2.1.4 Các dung dịch gốc để thực hiện Western Blotting 16
3.2.1.5 Các dung dịch để thực hiện Dot Blot 17
3.2.2 Thiết bị, dụng cụ 17
3.2.3 Vật liệu 18
3.2.3.1 Kháng thể 18
3.2.3.1 Mẫu . 18
3.3 Phương pháp . 18
3.3.1 Phương pháp SDS–PAGE . 18
3.3.1 Phương pháp SDS–PAGE . 18
3.3.1.1 Nguyên tắc . 18
3.3.1.2 Phương pháp tiến hành . 20
3.3.2 Phương pháp Western Blot 21
3.3.2.1 Nguyên tắc . 21
3.3.2.2 Phương pháp tiến hành 23
3.3.3 Gây nhiễm thực nghiệm cho tôm sú (Penaeus monodon) và tôm thẻ (Penaeus vannamei) bằng RTV được nhân lên trong tế bào Sf9 26
3.3.4 Phương pháp Dot Blot 27
3.3.4.1 Nguyên tắc . 27
3.3.4.2 Phương pháp tiến hành 27
3.3.5 Phương pháp sắc ký . 28
3.3.5.1 Nguyên tắc . 28
3.3.5.2. Phương pháp tiến hành 29

PHẦN 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN . 30

4.1 Kết quả SDS – PAGE 30
4.2 Kết quả Western Blot 32
4.3 Kết quả thí nghiệm gây nhiễm thực nghiệm . 34
4.4 Kết quả Dot Blot chỉ thị virus 37
4.5 Kết quả sắc ký lọc gel 40

PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 42

5.1 Kết luận . 42
5.2 Đề nghị 42

PHẦN 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO . 43