Đồ Án Nghiên cứu đa dạng dạng di truyền nguồn gen bông (Gossypium L.) sử dụng chỉ thị phân tử SSR

TÊN ĐỀ TÀI: Nghiên cứu đa dạng dạng di truyền nguồn gen bông (Gossypium L.) sử dụng chỉ thị phân tử SSR​

Information

Nghiên cứu đa dạng dạng di truyền ng



MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1

I. ĐẶT VẤN ĐỀ 1

II. MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI 3

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

I.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY BÔNG 4

I.1.1 Nguồn gốc, xuất xứ cây bông 4

I.1.2 Đặc điểm hình thái cây bông 5

I.1.3 Đặc điểm sinh thái 5

I.1.4 Đặc điểm genome 6

I.1.5 Giá trị sản xuất thương mại của các loài bông 6

I.2 ĐA DẠNG DI TRUYỀN 6

I.2.1 Khái niệm 6

I.2.2 Nguyên nhân phát sinh đa dạng di truyền 7

I.2.3 Các mức độ đa dạng di truyền 7

I.3 NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG DI TRUYỀN 8

I.3.1 Chỉ thị hình thái 8

I.3.2 Chỉ thị isozym 8

I.3.3 Chỉ thị phân tử trong nghiên cứu đa dạng di truyền 9

I.4 MỘT SỐ CHỈ THỊ PHÂN TỬ 9

I.4.1 Chỉ thị dựa trên cơ sở lai acid nucleic: RFLP 9

I.4.2 Chỉ thị dựa trên cơ sở PCR 10

I.4.2.1 Phản ứng PCR 10

I.4.2.2 Chỉ thị RAPD 14

I.4.2.3 Chỉ thị AFLP 15

I.4.2.4 Chỉ thị SSR 16

I.5 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG DI TRUYỀN TRÊN ĐỐI TƯỢNG CÂY BÔNG 18

I.5.1 Nghiên cứu đa dạng di truyền cây bông trên thế giới 18

I.5.2 Nghiên cứu đa dạng di truyền cây bông tại Việt Nam 19

CHƯƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20

II.1 VẬT LIỆU 20

II.1.1 Vật liệu thực vật 20

II.1.2 Hóa chất, thiết bị 21

II.1.3 Chỉ thị SSR 21

II.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24

II.2.1 Tách chiết ADN tổng số 24

II.2.1.1 Chuẩn bị vật liệu 24

II.2.1.2 Quy trình tách chiết 25

II.2.1.3 Kiểm tra ADN tổng số 26

II.2.2 Phản ứng PCR 26

II.2.2.1 Thành phần phản ứng PCR 26

II.2.2.2 Chương trình chạy PCR 27

II.2.3 Điện di, phát hiện sản phẩm 27

II.2.3.1 Nguyên tắc 27

II.2.3.2 Chuẩn bị gel agarose 27

II.2.3.3 Điện di sản phẩm PCR 28

II.2.4 Phương pháp phân tích số liệu: phương pháp phân tích đa dạng di truyền băng phần mềm NTSYS pc v.2.1 (Biostatistics Inc 2002) 28

CHƯƠNG III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31

III.1 KẾT QUẢ TÁCH CHIẾT ADN TỔNG SỐ 31

III.1.1 Mục đích 31

III.1.2 Các bước tiến hành 31

III.1.3 Kết quả và nhận xét 32

III.2 KẾT QUẢ PHẢN ỨNG PCR CỦA 20 CẶP MỒI SSR 33

III.2.1 Mục đích 33

III.2.2 Các bước tiến hành 33

III.2.3 Kết quả 34

III.2.4 Nhận xét kết quả 37

III.3 NHẬN DẠNG ADN 37

III.3.1 Mục đích 37

III.3.2 Các bước tiến hành 37

III.3.3 Kết quả 37

III.3.4 Nhận xét kết quả 43

III.4 HỆ SỐ PIC VÀ ĐA DẠNG CÁC ALLEN SSR 44

III.4.1 Mục đích 44

III.4.2 Các bước tiến hành 44

III.4.3 Kết quả 45

III.4.4 Nhận xét kết quả 47

III.5 HỆ SỐ TƯƠNG ĐỒNG DI TRUYỀN VÀ BIỂU ĐỒ QUAN HỆ DI TRUYỀN CỦA CÁC GIỐNG BÔNG NGHIÊN CỨU. 49

III.5.1 Mục đích 49

III.5.2 Các bước tiến hành 49

III.5.3 Kết quả và nhận xét 49

III.5.3.1 Hệ số tương dồng di truyền S 49

III.5.3.2 Biểu đồ quan hệ di truyền của các giống bông nghiên cứu 51

III.6 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH CẶP GIỐNG BÔNG CHO ĐA HÌNH DI TRUYỀN CAO 52

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55

TÀI LIỆU THAM KHẢO 56







uồn gen bông (Gossypium L.) sử dụng chỉ thị phân tử SSR