Chuyên Đề Giá trị phát hiện một số biến đổi di truyền ở bệnh nhân lơ xê mi cấp dòng tủy của phương pháp PCR so

Đề tài: Giá trị phát hiện một số biến đổi di truyền ở bệnh nhân lơ xê mi cấp dòng tủy của phương pháp PCR so với nhiễm sắc thể đồ
Các biến đổi nhiễm sắc thể t(15,17) (q22;q21) với biến đổi gen PML/RAR, t(8,21) (q22;q22) với biến đổi gen AML1/ETO và inv(16) (p13q22) với biến đổi gen CBF/MYH11 là những biến đổi di truyền quan trọng có vai trò trong chẩn đoán, tiên lượng và lựa chọn phác đồ điều trị bệnh lơ xê mi cấp dòng tủy. Ở Việt Nam, từ những năm 80 đã phát triển kỹ thuật di truyền tế bào để phát hiện các bất thường nhiễm sắc thể. Tuy nhiên kỹ thuật di truyền tế bào trong đánh giá các bất thường di truyền còn nhiều hạn chế. Từ năm 2006 viện Huyết học truyền máu TW đã áp dụng kỹ thuật di truyền phân tử (RT - PCR và nested - PCR) để nghiên cứu một số các biến đổi gen có vai trò quan trọng trong bệnh máu ác tính. Vì vậy chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài này với mục tiêu:
So sánh kết quả của phương pháp PCR với nhiễm sắc thể đồ trong phát hiện các biến đổi di truyền t(15,17)(q22;q21) với biến đổi gen
PML/RAR, t(8,21)(q22; q22) với biến đổi gen AML1/ETO và inv(16)(p13q22) với biến đổi gen CBF/MYH11 ở bệnh nhân lơ xê mi cấp dòng tủy.
I. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
1.Đối tượng nghiên cứu: 87 bệnh nhân được chẩn đoán xác định lơ xê mi cấp dòng tủy theo tiêu chuẩn của FAB (năm 1986) được điều trị tại khoa C8 viện Huyết học truyền máu TW và Khoa Huyết học truyền máu bệnh viện Bạch Mai từ 3/2007 đến 3/2009 bao gồm 24 bệnh nhân lơ xê mi cấp thể M3 và 63 lơ xê mi cấp thể tủy khác.
2. Phương pháp nghiên cứu
- Các bệnh nhân được chọc hút dịch tủy làm xét nghiệm nhiễm sắc thể đồ theo kỹ thuật nhuộm băng G và phân tích nhiễm sắc thể trên máy AXO 100 (Zeiss) và làm xét nghiệm RT - PCR, nested - PCR xác định các biến đổi gen PML/RAR, AML1/ETO và CBF/MYH11
- So sánh đối chiếu kết quả của 2 phương pháp.
Mục tiêu: so sánh kết quả của phương pháp PCR với nhiễm sắc thể đồ trong phát hiện các biến đổi di truyền t(15,17)(q22;q21) với biến đổi gen PML/RAR, t(8,21)(q22; q22) với biến đổi gen AML1/ETO và inv(16)(p13q22) với biến đổi gen CBF/MYH11 ở bệnh nhân lơ xê mi cấp dòng tủy. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: 87 bệnh nhân được chẩn đoán lơ xê mi cấp dòng tủy theo tiêu chuẩn FAB được điều trị tại viện Huyết học truyền máu Trung ương và Khoa Huyết học truyền máu bệnh viện Bạch Mai. Các bệnh nhân được chọc hút dịch tủy làm xét nghiệm nhiễm sắc thể đồ và PCR xác định các biến đổi gen PML/RAR, AML1/ETO, CBF/MYH1. Kết quả và kết luận: trong 16 bệnh nhân nhóm có PML/RAR chỉ có 9 bệnh nhân phát hiện có chuyển đoạn t(15;17) (q21;q22) chiếm tỷ lệ 56,25%. Trong 17 bệnh nhân nhóm có biến đổi gen AML1/ETO có 9 bệnh nhân phát hiện có t(8;21)(q22;q22) chiếm 52,9%. Trong 7 bệnh nhân có biến đổi gen CBF/MYH11 không có bệnh nhân nào phát hiện có inv(16)(p13q22)