Báo Cáo dùng trypsin để tách tế bào từ mô lách chuột

Đặt vấn đề


Để nuôi cấy sơ cấp hay thứ cấp tế bào động vật thì việc đầu tiên phải làm là tách rời các tế bào ra khỏi mô và giữa các tế bào với nhau. Nuôi cấy sơ cấp là phương pháp sử dụng các tế bào được tách từ các mảnh mô và trước lần cấy truyền đầu tiên. Quy trình được tiến hành bắt đầu từ việc thu nhận các mảnh mô. Sau đó các mảnh mô được xử lý để loại bỏ vi khuẩn, nấm và các thành phần không mong muốn khác. Tiếp theo chúng được huyền phù tế bào đơn trước khi nuôi cấy. Nuôi cấy thứ cấp được tiến hành sau khi tế bào được tạo dòng từ nuôi cấy sơ cấp. Các tế bào động vật trong khối mô liên kết chặt chẽ với nhau và với ECM nhờ các cầu nối protein hình thành giữa các tế bào với nhau. Để tách rời các tế bào trong khối mô, người ta thường dùng các enzyme protease như trypsin. Mô là tập hợp tế bào được tổ chức tinh vi và đặc trưng, chúng liên kết thành một khối thống nhất, thông qua các cầu nối gian bào. Tách các tế bào ra khỏi mô cần phải phá bỏ những cầu nối này, nhưng không gây tổn thương cho tế bào. Người ta có thể dùng cơ học hay enzyme cắt. Trong bài báo cáo này, tôi kết hợp cả hai để tăng hiệu quả tách. Vì theo tôi nếu dùng cơ học thì hiệu quả thấp hơn enzyme, nhưng nếu dùng enzyme thì tác dụng của enzyme lên tế bào là rất lớn. Vì vậy, việc kết hợp này để giảm thời gian xử lý bằng enzyme kết hợp với cơ học tăng khả năng tách tế bào.