Báo Cáo Chần đoán và thử nghiệm sản xuất kháng huyết thanh Rice ragged stunt virus ( RRSV)

Đề tài: Chần đoán và thử nghiệm sản xuất kháng huyết thanh Rice ragged stunt virus ( RRSV)

MỤC LỤC​
PHẦN I MỞ ĐẦU.. 1

1.1. Đặt vấn đề. 1
1.2. Mục đích và yêu cầu. 4
1.2.1. Mục đích. 4
1.2.2. Yêu cầu. 4

PHẦN II TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC 5

2.1. Tình hình nghiên cứu ngoài nước. 5
2.1.1. Lịch sử phát hiện và phân bố địa lý của RRSV 5
2.1.2. Tình hình gây hại của bệnh lùn xoắn lá. 6
2.1.3. Phổ kí chủ và triệu chứng bệnh lùn xoắn lá. 7
2.1.4. Sự truyền bệnh lùn xoắn lá. 8
2.1.5. Cấu trúc thể virus và phân tử bộ gen. 9
2.1.6. Huyết thanh học. 10
2.1.7. Những nghiên cứu về phương pháp huyết thanh học trong chẩn đoán virus thực vật 10
2.2. Tình hình nghiên cứu trong nước. 14

PHẦN III VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16

3.1. Vật liệu, địa điểm và thời gian nghiên cứu. 16
3.1.1. Địa điểm nghiên cứu. 16
3.1.2. Thời gian nghiên cứu. 16
3.1.3. Vật liệu nghiên cứu. 16
3.2. Phương pháp nghiên cứu. 17
3.2.1. Điều tra bệnh. 17
3.2.2. Phương pháp thu thập và bảo quản mẫu rầy bệnh. 18
3.2.3. Phương pháp Indirect ELISA 18
3.2.4. Phương pháp tinh chiết RRSV 19
3.2.5. Phương pháp RT-PCR 20
3.2.6. Kết tủa kháng thể và tinh chiết protein của cây sau đó cho hấp phụ chéo. 22
3.2.7. Phương pháp kiểm tra sự có mặt của RRSV trên các mẫu rầy thu thập. 24
3.2.8. Quy trình thực hiện tối ưa hoá phản ứng. 24

PHẦN IV KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 25

4.1. Kết quả kiểm tra ELISA trên các mẫu lúa miền Nam 25
4.2. Kết quả kiểm tra ELISA mẫu lúa bệnh thu thập tại một số tỉnh ở phía Bắc. 29
4.3. Kết quả kiểm tra ELISA trên mẫu rấy thu bắt tại một số tỉnh phía Bắc năm 2008 36
4.4. Kết quả kiểm tra ELISA trên các bộ phận khác nhau của cây lúa bệnh. 38
4.5. Thử nghiệm sản xuất kháng huyết thanh. 40
4.6. Tối ưu hoá các điều kiện phản ứng ELISA 46

PHẦN V KẾT LUẬN TỒN TẠI VÀ ĐỀ NGHỊ 50

5.1. Kết luận. 50
5.2. Tồn tại 51
5.3. Đề nghị 52

TÀI LIỆU THAM KHẢO 53