Thạc Sĩ Ảnh hưởng sự giảm biểu hiện Protein Dkk3 trên con đường tín hiệu EGFR ở dòng tế bào tPH5CH, HuH6 clo

ẢNH HƯỞNG SỰ GIẢM BIỂU HIỆN PROTEIN Dkk3
TRÊN CON ĐƯỜNG TÍN HIỆU EGFR Ở DÒNG TẾ
BÀO tPH5CH, HuH6 clone 5 VÀ RD
MỤC LỤC
Trang
Trang phụ bìa
Lời cảm ơn
Mục lục i
Danh mục các ký hiệu và các chữ viết tắt . iii
Danh mục các bảng .v
Danh mục các hình vi
LỜI MỞ ĐẦU 1
CHƯƠNG 1 – TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Họ protein Dickkopf và protein Dickkopf 3 3
1.1.1. Dkks .3
1.1.2. Protein Dkk3 5
1.2. Con đường tín hiệu Wnt .7
1.3. Con đường tín hiệu tế bào thông qua thụ quan EGF 9
1.4. EGFR đối với ung thư và liệu pháp đích trong điều trị 12
CHƯƠNG 2 – VẬT LIỆU, PHƯƠNG PHÁP
2.1. Vật liệu 15
2.1.1. Dòng tế bào 15
2.1.2. Hóa chất . 16
2.2. Phương pháp . 16
ii
2.2.1. Nuôi cấy tế bào . 16
2.2.2. Biến nạp siRNA vào tế bào nuôi cấy . 17
2.2.3. Realtime RT-PCR sử dụng SYBRGreen . 17
2.2.4. Western blot . 18
2.2.5. RayBio®Phospho-EGFR (Tyr 1086) and Pan EGFR ELISA . 21
2.2.6. Phân tích hình ảnh bằng phần mềm Imagine J 21
2.2.7. Phân tích và xử lý số liệu . 22
CHƯƠNG 3 – KẾT QUẢ, THẢO LUẬN
3.1. Kết quả khảo sát hình thái tế bào 23
3.2. Kết quả khảo sát hoạt động tín hiệu của con đường EGFR 25
3.2.1. Tế bào tPH5CH 27
3.2.2. Tế bào HuH6 clone 5 . 28
3.2.3. Tế bào RD 29
3.3. Kết quả khảo sát hoạt động của EGFR . 31
3.4. Thảo luận . 35
CHƯƠNG 4 – KẾT LUẬN 41
TÀI LIỆU THAM KHẢO
PHỤ LỤC